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山乌桕(Triadica cochinchinensis)是大戟科(Euphorbiaceae)乌桕属(Triadica)植物。植株为乔木或大灌木,在我国南方诸省如江西、云南、四川、贵州、湖南和福建广泛分布。该植物具有重要的药用价值,同时也是重要的蜜源植物,具有重要的经济价值。由于山乌桕花泌蜜量大且稳定,山乌桕蜜(Triadica cochinchinensis honey,TCH)是蜂农重要的单花蜜收成,但目前缺乏TCH化学组成和生物活性方面的研究基础。本论文采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF/MS)对TCH的化学组成进行了全面分析;通过小鼠喂养等体内实验考察了TCH对小鼠酒精肝损伤(ALD)的保护作用及机制以及对小鼠肠道菌群的影响。论文研究取得了一系列的创新性成果,为新型保健食品的研发和山乌桕蜜的深度利用提供了科学依据。本文以TCH为研究对象,使用UPLC-Q-TOF/MS检测了TCH的化学组成。并将雄性C57BL/6J小鼠随机分为7组,分别为空白对照组(PF组)、酒精模型组(AF组)、阳性对照组(PC组)、低浓度TCH组(LH组)、中浓度TCH组(MH组)、高浓度TCH组(HH组)和果葡糖浆组(FG组),处理12周后,收集小鼠肝组织、结肠内容物和血清。采用生化试剂盒检测小鼠血清的谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活力,采用苏木精伊红(HE)染色和油红染色评估小鼠ALD程度,采用蛋白质分子印迹法(WB)和酶联免疫吸附测定法(ELISA)评估小鼠肝脏炎症水平;通过对小鼠肠道菌群16S r DNA基因进行Miseq测序,进行肠道菌群物种组成分析及与其他指标的相关性分析,并用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)检测小鼠结肠内容物中短链脂肪酸(SCFAs)的浓度来评估TCH对小鼠肠道菌群的影响。本文系统地研究了TCH对酒精诱导小鼠肝损伤的保护作用及机制,以及TCH对酒精致使肠道菌群失衡的调节作用,主要研究结果如下。(1)TCH中N1,N5,N10?(E)三香豆酰亚精胺含量高达13599.44μg/kg,是TCH的标志性化合物。TCH中含有丰富的鞣花酸、没食子酸、水杨酸等酚酸化合物,含量分别是791.18、126.58、73.21μg/kg;也含有柚皮素、芦丁、槲皮素等黄酮类化合物,含量分别是159.55、109.09、95.51μg/kg。(2)酒精导致小鼠血清ALT及AST水平显著增加,PC组和LH组降低了两种指标,接近PF组;MH组和HH组降低了ALT水平,没有降低AST水平;FG组的ALT和AST均高于HH组,且AST浓度高于AF组。AF组出现肝组织脂肪变性,PC组和LH组有改善效果,MH和HH组也具有一定的缓解作用,FG组则加重了脂肪变性程度,造成了更严重的肝损伤。(3)酒精提高了小鼠肝组织的NFκB蛋白水平,同时也增加了TNF-α、IL-1β、IL-6,即激活了NFκB信号通路,TCH降低了以上的蛋白水平,抑制了NFκB信号通路。PC组则升高了NFκB蛋白水平,TNF-α、IL-1β、IL-6降低效果差于LH组,即TCH抑制炎症效果比水飞蓟素好。(4)从门水平来看,酒精导致小鼠的拟杆菌门丰度降低,厚壁菌门、变形菌门和放线菌门丰度升高,并提高了F/B值。LH组升高了拟杆菌门丰度,降低了厚壁菌门、变形菌门和放线菌门丰度,接近PF组小鼠肠道菌群的物种组成。从科水平来看,酒精导致Muribaculaceae和Rikenellaceae等科的丰度显著降低,Erysipelotrichaceae、Clostridiaceae和Lachnospiraceae等科的丰度显著升高,LH组升高了Muribaculaceae和Rikenellaceae等科丰度,降低了Erysipelotrichaceae、Clostridiaceae和Lachnospiraceae等科丰度,效果较好。从属水平来看,酒精导致Alloprevotella和Alistipes属丰度显著降低,Turicibacter和Parabacteroides属的丰度显著升高,LH组升高了Alloprevotella和Alistipes属的丰度,降低了Turicibacter和Parabacteroides属的丰度。LH组能改善酒精导致肠道菌群失衡,而MH、HH和FG组没有改善效果。(5)小鼠结肠内容物中SCFAs是乙酸和丁酸具有差异显著性,丙酸和戊酸不具有差异显著性。酒精导致乙酸含量显著升高,HH组和FG组降低效果最好,LH组也具有较好的降低效果。酒精降低了丁酸含量,TCH均具有恢复效果,HH组和FG组丁酸浓度均超过了PF组,HH组丁酸浓度最高。酒精降低了丙酸和戊酸的含量,LH组改善效果最好。综上所述,采用现代质谱学分析方法较为系统地分析了TCH的化学成分,发现其中含量最高的是三香豆酰亚精胺;采用小鼠体内实验发现,TCH具有预防ALD的作用,能降低肝脏脂肪变性和炎症水平;TCH对酒精导致的肠道菌群失衡和SCFAs含量变化具有改善作用;果葡糖浆加重了小鼠ALD,对酒精导致的肠道菌群失衡没有调节作用。论文研究成果为我国重要的单花蜜资源—TCH对ALD和肠道菌群的作用提供了重要的理论依据,有助于提高人们对TCH的健康效益和商业价值的认识。