【摘 要】
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人工授精是动物遗传改良的重要技术措施。精液保存是人工授精的关键环节,而冷冻保存是精液保存的主要方法。冷冻保存过程中,细胞内活性氧过量生成和抗氧化酶系统破坏引起的氧化应激是冷冻损伤的主要因素。本研究在绵羊精液冷冻稀释液中添加0μM、20μM、40μM、60μM的线粒体靶向抗氧化剂（Mito-TEMPO）,冷冻-解冻后检测精子运动能力、质膜完整性、DNA完整性、线粒体活性、精清抗氧化相关指标和精清线粒
【基金项目】
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青年三晋学者专项（2016）； 山西省自然科学基金（201901D111234）；
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人工授精是动物遗传改良的重要技术措施。精液保存是人工授精的关键环节,而冷冻保存是精液保存的主要方法。冷冻保存过程中,细胞内活性氧过量生成和抗氧化酶系统破坏引起的氧化应激是冷冻损伤的主要因素。本研究在绵羊精液冷冻稀释液中添加0μM、20μM、40μM、60μM的线粒体靶向抗氧化剂（Mito-TEMPO）,冷冻-解冻后检测精子运动能力、质膜完整性、DNA完整性、线粒体活性、精清抗氧化相关指标和精清线粒体酶活性,研究其对绵羊冷冻精液质量和精子能量代谢相关蛋白表达的影响,为Mito-TEMPO在绵羊精液冷冻稀释液中的应用提供科学依据。主要结果如下:1.冷冻-解冻后各试验组的路径速度（VAP）、曲线运动速度（VCL）和直线运动速度（VSL）均显著高于对照组（P＜0.05）,40μM组的精子活力、活率、DNA完整率均显著高于对照组和其他试验组（P＜0.05）,精清丙二醛（MDA）含量、乳酸脱氢酶（LDH）活性、谷草转氨酶（GOT）活性和琥珀酸脱氢酶（SDH）活性显著低于对照组和其他试验组（P＜0.05）;20μM组和40μM组的精子质膜完整率、线粒体活性、精清超氧化物歧化酶（SOD）活性、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性和总抗氧化能力（T-AOC）均显著高于对照组和60μM组（P＜0.05）;各试验组精清中过氧化氢酶（CAT）活性均显著高于对照组（P＜0.05）。2.选择对照组和40μM组的冷冻精液进行Western Blotting,检测冷冻-解冻后精子能量代谢相关蛋白GLUT 3和GLUT 8的表达。结果表明:与对照组相比,40μM解冻后精子的GLUT 3和GLUT 8蛋白表达量显著提高（P＜0.05）。综上所述,稀释液中添加适宜浓度（40μM）的Mito-TEMPO可提高精清抗氧化酶活性,保护精子质膜和DNA完整性,降低精清中线粒体相关酶活性,提高线粒体活性,减轻精子的氧化损伤,促进精子能量代谢转运蛋白GLUT 3和GLUT 8表达,改善其运动能力,进而提高了绵羊冷冻精液的质量。
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