木豆叶黄酮含量及其提取纯化工艺研究

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jxczl900424
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本研究建立了木豆总黄酮含量的检测方法,收集131份木豆种质资源并研究比较了不同种质资源木豆叶的总黄酮含量;对木豆不同器官、不同成熟度叶片的总黄酮含量差异以及不同生育期的木豆叶片总黄酮含量的累积变化规律进行深入研究,为最终确定木豆总黄酮的最佳提取原料提供依据。同时,本文还研究了木豆叶总黄酮的超声提取和膜分离纯化工艺。主要结果如下:1.建立了一套应用紫外分光光度法测定木豆叶总黄酮含量的检测方法。该检测方法的标准曲线在浓度0-100 ug/mL的范围内线性良好(相关系数R2=0.9999),稳定性高,重复性好,加样回收率在99.01-102.72%。2.分别测定131份木豆资源现花期的叶片总黄酮含量。结果表明木豆叶总黄酮含量在种质资源间存在极显著差异,含量最高达4.73%,最低为1.10%,相差3.3倍。3.研究木豆不同器官总黄酮含量。结果表明,木豆的黄酮类物质主要分布在叶片和花中,籽粒中含量甚少,其含量高低依次为叶片>花>荚壳>叶柄>籽粒。对不同成熟度的叶片总黄酮含量进一步分析得知,新叶叶片的总黄酮含量显著高于成熟叶叶片和老叶。从播种后75天至开花期,木豆叶总黄酮含量随生长时间的延长而不断增加,呈现明显的累积现象。4.研究木豆叶总黄酮的超声提取工艺,通过单因素和L9(34)正交实验,探讨超声时间、乙醇浓度、料液比对木豆叶总黄酮得率的影响。结果表明,木豆叶总黄酮超声提取最佳工艺参数为:超声时间20 min,乙醇浓度70%,料液比1:30,木豆叶提取得率38.1%,提取物总黄酮纯度9.32%。5.研究木豆叶提取液的膜分离纯化技术。结果表明,微滤能截留提取液中15.78%的黄酮类物质,超滤能截留提取液中62.52%的黄酮类物质,而纳滤能截留提取液中97.92%的黄酮类物质。木豆提取液经微滤、超滤、纳滤3级膜分离纯化,木豆叶提取物中黄酮纯度可达50.13%。超滤浓缩液中牡荆苷含量可达0.069mg/g (HPLC),异牡荆苷含量为4.31 mg/g(HPLC)
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