论文部分内容阅读
目的①通过与基础治疗(饮食控制+合理运动)对照,观察胃热湿阻型单纯性肥胖患者应用佩连麻黄方及基础治疗前后体重,体重指数(BMI),腰臀比(WHR),血清瘦素(Leptin),总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白(LDL-C),中医证候积分等指标变化情况,评价佩连麻黄方治疗肥胖的临床疗效；②通过观察单纯性肥胖大鼠应用佩连麻黄方干预42天后,大鼠下丘脑及脂肪组织OB-Rb、受体后JAK2-STAT3信号转导通路的变化,运用实时荧光定量PCR(Real time-PCR)技术及Western blot方法对肥胖大鼠下丘脑OB-Rb,SOCS-3,POMC及脂肪组织OB-Rb,SOCS-3,JAK2,STAT3, pJAK,pSTAT3的表达水平进行检测,探讨佩连麻黄方治疗单纯性肥胖的可能作用机制。方法①临床研究：选择胃热湿阻型单纯性肥胖受试者90例作为观察对象,将入选受试者随机分为两组,对照组采用基础治疗(饮食控制+合理运动),治疗组在对照组的基础上加用佩连麻黄方,150m1,日2次服用。连续治疗90天,监测并记录治疗过程中受试者的中医证候积分,体重,BMI, WHR,TC,TG,LDL-C, Leptin及安全性评价指标的变化。②动物实验研究：采用高脂饮食建立肥胖大鼠模型,分为模型对照组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组,每组10例及正常对照组10例,分别予中药或蒸馏水干预6周,治疗结束后采血并处死,迅速取出下丘脑及腹腔内脂肪组织,采用ELISA法测定血清Leptin,全自动生化分析仪检测TC, TG,运用实时荧光定量PCR技术及Western blot检测肥胖大鼠下丘脑OB-Rb, SOCS-3mRNA, POMC蛋白表达及脂肪组织OB-Rb, SOCS-3,JAK2, STAT3mRNA,pJAK2, pSTAT3蛋白表达水平。结果临床疗效观察①改善中医症状方面,两组间比较,佩连麻黄方的显效率、总有效率及中医症状积分有明显差异(P<0.05),对中医证候、体征的改善有明显优势。②两组体重在第60天即有明显变化,治疗组体重下降差异明显(P<0.05)；第90天,治疗组比对照组的体重下降差异显著(P<0.01),治疗组BMI.WHR改善情况较对照组更明显(P<0.05)。可以看出加用佩连麻黄方的治疗组在减重速度与程度方面的疗效,均明显优于单用基础治疗的对照组。③治疗后,与对照组比较,治疗组TG有一定程度改善,统计学有明显差异(P<0.05)；两组TC.LDL-C均有下降,但比较无统计意义(P>0.05),在降低血脂方面,治疗组改善TG的作用优于对照组。动物实验研究①模组大鼠分组前,与正常对照组比较,体重明显增加(P<0.05),且体重增长速度明显较正常对照组加快；治疗后,与正常对照组比较,模型对照组体重显著增长(P<0.01)；与模型对照组比较,低剂量佩连麻黄方减重不明显(P>0.05),高剂量组、中剂量组则显著下降(P<0.01),②在脂代谢方面,治疗后,与正常对照组比较,模型对照组TG, TC显著升高(P<0.01,P<0.05),与模型对照组比较,高剂量组TG下降更明显(P<0.05),低剂量组则对血脂的改善均不明显(P>0.05)。高剂量的佩连麻黄方可有效调节TG水平③模型对照组大鼠血清Leptin水平显著高于正常对照组(P<0.01),单纯性肥胖大鼠存在高Leptin血症,考虑Leptin抵抗；与模型对照组比较,高剂量组、中剂量组血清Leptin均显著下降(P<0.01)。④下丘脑与脂肪组织实时定量PCR的检测结果显示,下丘脑模型对照组SOCS-3mRNA相对表达量显著高于正常对照组(P<0.01)；脂肪组织模型对照组SOCS-3mRNA相对表达量明显高于正常对照组(P<0.05)。与模型对照组比较,下丘脑与脂肪组织中的高剂量组、中剂量组SOCS-3mRNA相对表达量均明显降低,两组间比较差异不明显(P<0.05)；两组织中的低剂量组SOCS-3mRNA表达量与模型对照组比较差异不明显(P>0.05)。下丘脑与脂肪组织中各组OB-RbmRNA的相对表达量比较均无明显差异(P>0.05)。⑤下丘脑POMC蛋白的表达情况,与正常对照组比较,模型对照组POMC表达显著降低(P<0.01)；与模型对照组比较,高、中剂量组POMC蛋白表达均明显升高(P<0.05),低剂量组POMC表达量无明显差异(P>0.05)。⑥脂肪组织JAK、STAT3mRNA相对表达量与pJAK2、pSTAT3蛋白表达相对灰度值。模型对照组JAK2mRNA相对表达量明显低于正常对照组(P<0.01)；与模型对照组比较,高、中剂量组JAK2mRNA相对表达量均有下降,差异明显(P<0.05),各组STAT3mRNA表达量比较无统计学意义,差异不明显(P>0.05)。与正常对照组比较,模型对照组pJAK2蛋白表达明显减少(P<0.05),pSTAT3蛋白表达显著减少(P<0.01)；与模型对照组比较,高剂量组、中剂量组pJAK2、pSTAT3蛋白表达增加,差异明显(P<0.05)。结论①佩连麻黄方可有效减轻胃热湿阻型单纯性肥胖患者体重,明显减小BMI、WHR,中医证候积分,有效改善临床症状及体征,并改善血脂(TG)代谢。②研究结果与肥胖个体多存在Leptin抵抗的理论相一致,机体的高Leptin水平可能与下丘脑及脂肪组织抑制因子SOCS-3表达增加及受体后JAK-STAT通路活性下降有关。③佩连麻黄方可能通过减少下丘脑及脂肪组织SOCS-3表达及增加JAK2、STAT3的磷酸化,活化OB-Rb后信号转导通路,增加Leptin敏感性,解除高Leptin血症,并进一步提高POMC神经元活性,增强其抑制食欲的作用。