目的:明确增强自噬水平对中年小鼠海马神经发生的影响,寻找在体激活海马神经发生的有效途径,为神经退行性疾病的防治提供新思路。方法:1.分离、提取新生及中年小鼠(6月龄)海马组织蛋白,通过Western blot检测海马中自噬相关蛋白LC3Ⅱ含量变化,观察年龄对自噬水平的影响。2.中年小鼠腹腔注射自噬激活剂雷帕霉素(4mg/kg),隔天一次,持续给药4周后提取小鼠海马组织蛋白,检测雷帕霉素靶蛋白mTOR及下游靶蛋白ULK1ser757磷酸化水平,并测定海马组织中自噬相关蛋白LC3Ⅱ及P62含量,观察自噬水平的改变。3.使用免疫荧光染色,检测雷帕霉素组及DMSO对照组小鼠海马SGZ区Ki67及DCX的数量变化,观察自噬水平改变对海马神经发生的影响。4.中年小鼠持续接受雷帕霉素4周后通过新物体识别、Y迷宫自发交替检测小鼠学习记忆和空间记忆能力,观察自噬水平变化对小鼠学习记忆能力的影响。结果:1.Western blot结果显示中年小鼠海马组织中LC3Ⅱ含量较新生小鼠下降了24.66±6.26%(P<0.05),提示小鼠在进入中年后,其海马自噬水平明显下降。2.腹腔注射给予中年小鼠雷帕霉素4周后,Western blot检测结果发现,小鼠海马组织中mTOR及ULK1 ser757的磷酸化水平较DMSO对照组分别下降了28.16±0.05(P<0.01)与24.30±0.05%(P<0.05)。雷帕霉素组小鼠海马LC3Ⅱ表达量较DMSO对照组明显增加,同时P62蛋白表达下降。结果提示,腹腔注射雷帕霉素可有效抑制中年小鼠海马mTOR,进而活化ULK1,提高中年小鼠海马自噬水平。3.免疫荧光染色结果显示,中年小鼠腹腔注射雷帕霉素后,其海马SGZ区Ki67~+与DCX~+细胞数量较DMSO对照组分别增长了55.38±13.06%(P<0.05)、39.32±12.01%(P<0.05),且雷帕霉素组小鼠DCX~+细胞突起长度及数量明显提升。新物体识别实验结果显示雷帕霉素组小鼠新物体识别指数为67.50±3.40%,较DMSO组57.45±2.65%明显升高(P<0.05);Y-迷宫自发交替检测结果显示雷帕霉素组与DMSO对照组的入臂次数无显著差别,但雷帕霉素组小鼠正确交替反应率较DMSO对照组升高了10.52±2.57%(P<0.001)。表明雷帕霉素可有效促进中年小鼠海马神经发生,增强小鼠学习记忆。结论:小鼠进入中年后其海马自噬水平明显降低;腹腔注射雷帕霉素可有效提升中年小鼠海马自噬水平,促进海马神经发生,进而增强小鼠学习记忆。