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背景与目的:甲醛是一种常见的环境污染物;严重影响人类健康。为了探讨甲醛对胚胎发育的影响;本研究建立爪蛙胚胎早期发育模型;研讨胚胎早期甲醛暴露对生长发育的影响。 方法:按标准方法饲养爪蛙;获得胚胎;待爪蛙胚胎发育至第2-4期开始暴露于0-100ug/ml甲醛稀释液至胚胎发育第46期。(1)活体胚胎、整体胚胎原位杂交(Whole-mount RNA in situ hybridization ; WMISH)、联苯胺染色观察胚胎表型变化;(2)蛋白质印迹技术(Western blot;WB)检测DNA损伤标记物γH2A.X表达;(3)实时荧光定量PCR(Real-time Quantitative PCR;RT-q PCR)检测DNA损伤及凋亡相关基因mRNA的表达;(4)TUNEL检测胚胎细胞凋亡情况。 结果:随着甲醛浓度升高;爪蛙胚胎的生存率逐渐下降。当甲醛浓度为10、20、25ug/ml时;胚胎的体长逐渐缩短、畸形率逐渐上升(p<0.05)。当暴露于10ug/ml甲醛培养液时;甲醛对爪蛙胚胎死亡无影响;但可导致胚胎畸形;如体长缩短、体轴弯曲、心脏增大等;还可导致心脏 TnI(Troponin I)及胰腺 PDIP(Protein disulfide isomerase family A member)表达增加;血液关键基因MPO(Myeloperoxidase)、RUNX1(Runt related transcription factor 1)表达下降;甲醛暴露导致γH2A.X蛋白及DNA损伤相关基因ATM、NBS1、GADD45a mRNA 上调;同时导致胚胎凋亡增加。 结论:甲醛暴露对爪蛙胚胎有呈浓度依赖性的致死性。当甲醛暴露浓度为10ug/ml时;甲醛可导致胚胎畸形;干扰心脏、胰腺、血液发育相关基因的表达;导致胚胎细胞DNA损伤;促进胚胎细胞凋亡。这些结果为孕早期甲醛暴露可能引起的胎儿缺陷提供了一个新的理论依据。