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淀粉酶由一系列的酶组成,占据了酶市场的25%左右。高温淀粉酶是广泛应用于酿酒、制糖等食品行业,医药、纺织、印染和环境治理等行业也有重要应用。在当今,希望α-淀粉酶能够在高温下比如说凝胶化和液化有活性,这样可以节约成本。嗜碱性、耐高温淀粉酶能够在温度为80℃~100℃,pH为pH8.0~10.0的范围仍然保持较高的活性。本文主要详细研究了一株能够分泌高温淀粉酶的菌株的生长,产酶特征,以及其产生的高温α-淀粉酶的一些特性。该菌株来自西藏当雄温泉附近的土壤中。用锥虫蓝平板,55℃培养,经过多次筛选得到。经生理生化初步鉴定后,克隆16s rDNA基因测序,提交GeneBank比对后,鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheninformis),命名为B.licheninformis LT。本次实验中均采用分光光度法,建立酶浓度与反应时间的关系从而测定酶活力。通过对B.licheninformis LT的生长条件和产酶条件的研究表明:LB培养基中可以在pH3.0~11.0,20℃~ 65℃的条件下生长,添加一定量淀粉具有刺激产酶之作用,产酶最适温度50℃,最佳产酶pH 10.0,发酵液单位酶活可达65 U。经优化培养基(g/100 mL)(黄豆粉1.5,玉米粉1.5, NaCl 1, K2HPO4 0.01, KH2PO4 0.01, CaCl2 0.4,司盘40 0.1,pH 10.0)在50℃、装液量10%、180 r/min的摇床培养72 h后,测得酶活105 U。优化条件下350 mL发酵液通过硫酸铵、酒精相继沉淀,离心收集沉淀物,冷冻干燥后可以得到淡黄色有刺激性气味的固体酶粉约3.5 g左右。通过对酶性质的研究可得知:酶的最适反应温度为95℃,最适酶作用pH10.0,适量浓度Ca2+在60℃~80℃的范围对酶活力有激活作用,在80℃以上对酶活力有抑制作用,过高浓度的Ca2+对酶活力有抑制作用。Mg2+在60℃~90℃的范围对酶活力有激活作用,在90℃以上对酶活力有抑制作用。甘氨酸、Li+、Fe2+、Sn2+等对酶有激活作用,磷酸铵、磷酸氢二钾、Ba2+对酶活力影响不大,Cu2+、Fe3+、Zn2+、Bi3+、Al3+、乙二胺四乙酸钠使酶失去活性。本文还研究了该酶反应的动力学特征,通过测定不同底物浓度下的酶活力可得知:该酶反应属于底物抑制型。最后介绍了该酶在纺织退浆工业的应用。讨论了酶浓度、温度、pH值、金属离子浓度及处理时间等对退浆率的影响,确定了耐温淀粉酶退浆工艺,和传统碱退浆相比,耐温淀粉酶能减少环境污染。