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该研究目的是建立一种新的T细胞表位鉴定方法,用于分析HCV NS3 CD4<+>T细胞表位.1.HCV NS3区酵母展示随机表位文库的构建;2.纯化细胞膜HLA DR分子;3.以HLA DR分子为配基筛选HCV NS3区酵母展示随机表位文库;4.可溶性HLA DR分子的真核和原核表达.通过PCR扩增在AJUN和B15FOS融合基因5端加上启始密码子,同时更换酶切位点为EcoR Ⅰ和BamHⅠ.酶切连接到载体pBV220,转化E.coli DH5α菌株.各取1个经PCR鉴定插入片段大小正确的克隆进行序列分析.序列分析结果与预期融合蛋白序列一致.42℃进行诱导培养,通过对比诱导前后菌体蛋白的电泳图,可以看出AJUN和B15FOS的表达蛋白分别为33kDa和31kDa.AJUN表达蛋白量较B15FOS多.菌体蛋白裂解液进行SDS-PAGE电泳表明绝大多数AJUN表达蛋白以包涵体形式表达,少量以可溶形式表达.