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S-雌马酚是大豆异黄酮的体内代谢产物,是植物雌激素中生物活性最高的化合物。生物转化合成S-雌马酚的研究是该研究领域的一大焦点。本研究从大鼠肠道筛选到一株可以生物转化大豆苷元生产S-雌马酚的菌株LH-52,并对生物转化生产S-雌马酚的工艺进行了初步研究。主要研究结果如下。首先,采用LC-MS检测确定大鼠肠道为菌种筛选来源。使用抗生素抑制非目的菌的生长来富集产S-雌马酚细菌,并从大鼠肠道内筛选分离到一株可以将大豆苷元转化为雌马酚的革兰氏阴性兼性厌氧菌株,通过16S rDNA序列测序以及Genbank中BLAST(Basic LocalAlignment Search Tool)比对鉴定菌株的系统发育学地位,结果表明该菌株与奇异变形杆菌(Proteus mirabilis)相似度达到了99%,利用Neighbor-joining法绘制系统进化树。菌株的形态特征和生理生化实验结果也验证了该菌为奇异变形杆菌,将该菌株命名为Proteus. mirabilis LH-52。其次,通过制备型HPLC分离制备转化产物,并根据HPLC保留时间、质谱、核磁共振等波谱数据对产物的结构进行鉴定,结果表明转化产物为雌马酚。建立外消旋雌马酚的手性柱HPLC拆分方法,并对产物的手性进行鉴定,确定产物为S-雌马酚。最后,对菌株P. mirabilis LH-52的S-雌马酚转化特性进行了初步研究,采用单因素实验对培养基配方以及培养条件进行优化。生物转化产S-雌马酚的优化后培养基组成:葡萄糖浓度2g/L,蛋白胨浓度33g/L,NaCl浓度1g/L,十二水合磷酸氢二钠浓度2.5g/L;优化后培养条件为:转化时间5d,大豆苷元添加量100μmol/L,初始pH6.0,培养温度37℃。在优化后的工艺条件下S-雌马酚的产率可达55%。本研究中所筛选到的Proteus mirabilis LH-52菌株为国内首次筛选到的可以转化大豆苷元为S-雌马酚的兼性厌氧菌菌株,相对于以往报道中严格厌氧的S-雌马酚生产菌株,兼性厌氧的Proteus mirabilis LH-52菌株培养条件更为粗放,培养基营养成分要求更低,更适合用于工业化生产。