未甲基化CpG寡核苷酸诱导人PBMC抗膀胱肿瘤细胞的实验研究

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背景与研究目的:未甲基化CpG基序的寡核苷酸CpG ODN通过结合Toll样受体9(TLR9)可诱导浆细胞样树突状细胞(PDC)活化,促进其在归巢的同时由未成熟状态向成熟状态转化,并有效地提呈抗原,增加共刺激分子的表达,提供T细胞活化需要的第二信号;另外,CpG ODN诱导PDC释放细胞因子IFN-α、同时在CD40L的协助下释放IL-12,由此引发T细胞向Th1方向分化并活化NK细胞,释放IFN-γ,启动先天性免疫和获得性免疫。本研究旨在探讨CpG ODN在诱导人PBMC增殖、抗肿瘤细胞因子的释放、淋巴细胞表型的变化与诱导人PBMC对膀胱肿瘤细胞的杀伤作用。探索CpG寡核苷酸的抗肿瘤作用,并作为膀胱肿瘤免疫治疗新策略的可行性。 方法:1.采用MTT法测定A型CpG ODN2216和B型CpG ODN2006作用后人PBMC淋巴细胞增殖;2.采用定量酶联法检测梯度浓度CpG ODN作用后人PBMC产生IFN-α、IL-12、IFN-γ、TNF-α的变化:3.流式细胞仪检测梯度浓度CpG ODN作用后人PBMC中NK细胞、B细胞、CD4~+T
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