小麦-华山新麦草衍生后代条锈病抗性鉴定及H5-2-9-1-1-2成株期抗条锈基因定位

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由条锈菌引起的小麦条锈病是小麦的主要病害之一,造成了严重的产量损失。多年的小麦品种间杂交致使育成的小麦品种条锈病抗病性下降甚至消失,加上小麦条锈菌菌种的频繁变异,导致小麦抗条锈病的遗传基础越来越薄弱。华山新麦草(Psathyrostachys huashanica Keng,2n=14,Ns Ns)是重要的小麦野生亲缘种,对目前大部分主要流行的条锈菌生理小种均表现免疫或高抗,是一个优质的条锈病抗源。本研究对34份普通小麦-华山新麦草衍生后代材料进行成株期条锈病抗性鉴定,通过人工接种条锈混合菌种(水源14、CYR32、CYR33和CYR34),从中筛选抗条锈病材料,并对其抗性来源进行分析;将小麦-华山新麦草渐渗系H5-2-9-1-1-2与感病材料铭贤169杂交构建F2群体,以BSA法为主要研究手段,利用660K SNP芯片和SSR分子标记分析对条锈病抗性基因/QTL进行初定位。其主要研究结果如下:1、对34份普通小麦-华山新麦草衍生后代材料人工接种条锈混合菌种(水源14、CYR32、CYR33和CYR34),进行成株期条锈病抗性鉴定,筛选出了5份中抗及高抗条锈病的衍生后代材料,其中H611、H5-2-9-1-1-2与H30-2-3-1-1高抗(HR)条锈病;H18-1-3-1-6-2-2与H30-4-4-1-6-2-6中抗(MR)条锈病。2、对筛选出的5份抗条锈病材料进行细胞学观察、基因组原位杂交鉴定和分子标记鉴定,结果表明对条锈病达中抗水平的H18-1-3-1-6-2-2和H30-4-4-1-6-2-6为小麦-华山新麦草2Ns(2D)代换系,而对条锈病达高抗水平的H30-2-3-1-1、H5-2-9-1-1-2和H611为小麦-华山新麦草渗入系。3、以高抗条锈病的H5-2-9-1-1-2和高感条锈病的铭贤169杂交,再自交一代而获得的F2分离群体为研究对象,对其进行成株期条锈病抗性鉴定,结果表明F2群体的各级反应型之间没有明显的比例关系,其正态P-P图表明F2群体的各级反应型符合正态分布,说明H5-2-9-1-1-2中的抗条锈基因是数量性状。4、在F2中选取15株极抗条锈病的单株和15株极感条锈病的单株,提取DNA后,等量混合成抗病池和感病池,利用660K SNP芯片测序对两个亲本和两个池进行检测,结果表明H5-2-9-1-1-2中的抗条锈病主效QTL位于4A染色体597-686Mb之间。5、在差异SNP密集的区域合成SSR分子标记,得到了7对与抗病基因连锁的SSR标记,分别是WMC650、BAR0170、WMC468、BARC1158、WMC161、WMC718和WMC262。并用这7对SSR标记对F2群体进行了连锁分析,构建了全长为37.39 c M的遗传图谱,最终将抗条锈病主效QTL定位在了SSR标记BARC1158和WMC161之间,间隔5.30 c M,命名为QYr.nwafu-4AL。此抗条锈病QTL可解释的表型变异率为32.0347%。
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