卵泡抑制素(follistatin, FST)是一种单链糖蛋白,也被称为卵泡休止素或者性激素抑制蛋白。它由单基因编码,编码区分为三个结构功能域,其中第一结构功能域与肌肉的生长有关,在高等动物几乎所有的组织中都有表达,具有广泛的生理作用。FST可以抑制转化生长因子(transforming growth factor, TGF)β超家族中的大部分成员蛋白的活性通过与其结合,从而有利于肌纤维发生广泛的肥大和增生。FST可与肌肉生长抑素(Myostatin)的C-端结合,抑制肌肉生长抑素跟受体结合,从而促进骨骼肌发育。本实验以民猪的FST基因为研究对象,采用克隆测序的方法得到FST基因的编码区。通过把骨骼肌特异性启动子a-actin和FST基因编码区插入到pEGFP-Cl载体中构建了可以在小鼠骨骼肌细胞中特异表达的pEGFP-Cl-α-actin-FST载体(P3载体)和pEGFP-Cl-CMV-a-actin-FST载体(P4载体)。Real-time PCR检测目的基因FST及其相关基因MYOD、 MYOG、MSTN、GDF11的相对表达量。本实验研究结果如下：(1)成功克隆了猪FST基因完整编码区序列,大小为1032bp,编码344个氨基酸。(2)成功构建了pGL3-basic-α-actin载体(P1载体)和pGL3-basic-CMV-α-actin载体(P2载体),通过双荧光素酶活性测定,融合启动子的启动效率显著高于单独启动子的启动效率。(3)将构建的P3载体和P4载体瞬时转染小鼠骨骼肌细胞,FST基因的mRNA水平表达量显著提高,FST基因在小鼠骨骼肌细胞中特异性高表达。(4)在FST基因特异性高表达的小鼠骨骼肌细胞中,MSTN基因的表达量极显著升高(P<0.01), MYOD基因的表达量显著升高(P<0.05), MYOG基因和GDF11基因的表达量无显著变化。