BMSCs移植联合电针刺激治疗对脑出血大鼠脑内骨形态发生蛋白、胶质细胞和血管再生的影响

来源 :泸州医学院 西南医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huahua_yang
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目的通过骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)移植联合电针(electric acupuncture, Ea)刺激治疗脑出血大鼠,观察出血灶及周边骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2, BMP2)、神经胶质抗原-2(neuroglia antigen-2, NG2)、半乳糖脑苷脂(galactocerebroside, GALC)、CD68蛋白及层粘连蛋白(laminin, LN)的表达变化,探讨联合治疗对骨形态发生蛋白、脑内胶质细胞和血管再生影响。方法100只雄性SD大鼠建立脑出血模型,随机分BMSCs移植联合电针治疗组(BMSCs+Ea组)、MSCs移植组(BMSCs组)、电针治疗组(Ea组)和生理盐水组(NS组),每组25只。术后第三天分别给予BMSCs移植联合电针刺激、BMSCs移植、电针刺激和注射生理盐水治疗;又根据处死时间的不同,每组大鼠又分成1d、3d、5d、7d、14d5个亚组,每亚组5只。取脑制成冰冻切片,免疫组化检测BMP2、NG2、GALC、CD68、LN蛋白的表达。结果1.出血灶周边脑区BMP2阳性细胞计数并分析:各组BMP2阳性细胞数先呈上升趋势而后下降。BMSCs+Ea组比NS组在1d-14d时增多,BMSCs组比NS组在3d-5d升高(P<0.05)。Ea组和NS组相比较无显著差异。BMSCs+Ea组比Ea组在1d、5d和7d时增多,BMSCs组比Ea组在1d和5d时上升(P<0.05)。BMSCs+Ea组与BMSCs组相比在1d和14d时上调(P<0.05)。2.出血灶周边脑区NG2阳性细胞计数并分析结果显示:BMSCs+Ea组比NS组在1d-7d时增多,BMSCs组比NS组在5d和14d升高(P<0.05)。Ea组与NS组相比差异无统计学意义。BMSCs+Ea组比Ea组在1d、3d、5d和14d时增多,BMSCs组比Ea组5d和14d时上升(P<0.05)。BMSCs+Ea组与BMSCs组相比在1d-5d时上调(P<0.05)。3.出血灶周边脑区GALC阳性细胞计数后分析,BMSCs+Ea组比NS组在1d-7d时增多,BMSCs组比NS组在1d-7d升高,Ea组比NS组在7d时上升(P<0.05)。BMSCs+Ea组比Ea组在1d-5d时增多,BMSCs组比Ea组在5d时上升(P<0.05)。BMSCs+Ea组与BMSCs组相比在1d-3d时上调(P<0.05)。4.出血灶周边脑区CD68蛋白光密度值变化:BMSCs+Ea组、BMSCs组和Ea组CD68蛋白光密度值先缓慢上升而后逐渐下降,7d时达到峰值。NS组在1d-14d均呈上升趋势。BMSCs+Ea组比NS组在1d-14d时增大, BMSCs组比NS组在1d-5d升高,在14d时下降,Ea组比NS组在14d时减小(P<0.05)。BMSCs+Ea组比Ea组在1d-7d时增大(P<0.05)。BMSCs组比Ea组相比较差异无统计学意义。BMSCs+Ea组与BMSCs组相比在5d-7d时上调(P<0.05)。5.对出血灶周边脑区血管计数并分析:BMSCs+Ea组血管数比NS组在5d-14d时增多,BMSCs组比NS组在3d-7d升高,Ea组比NS组在3d时上升(P<0.05)。BMSCs+Ea组比Ea组在5d-14d时增多,BMSCs组比Ea组5d-14d时上升(P<0.05)。BMSCs+Ea组与BMSCs组相比较在7d时上调(P<0.05)。结论1.BMSCs移植联合电针治疗较单纯的BMSCs移植和电针刺激治疗更能促进脑出血大鼠BMP2的表达,这有助于脑内NSCs和BMSCs向神经细胞方向转化及脑组织结构重塑。2.BMSCs移植联合电针治疗早期可促进少突胶质前体细胞和少突胶质细胞的增殖,利于髓鞘形成;后期则抑制其增殖,可能与防止胶质瘢痕的形成有关。3.BMSCs移植可早期激活小胶质细胞,促进其快速增殖;联合电针治疗后早期上调其活化和增殖的能力,积极参与免疫反应。4.单纯BMSCs移植和电针刺激治疗可在一定时间内促进血管再生;BMSCs移植联合电针治疗更有利于血管的生成,有助于改善出血灶及周边区微环境。
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