【摘 要】
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背景:胃癌是世界范围内最常见的消化道恶性肿瘤之一。由于胃癌发病隐匿,患者被诊断时常处于进展期或晚期。尽管近年来早期胃癌的诊断率有所提高,但是进一步的研究胃癌发生发展的生物学基础、开发有效的早期诊断和预后评估指标对于胃癌的治疗仍具有重要意义。长链非编码RNA(lncRNA)是近年来肿瘤领域的研究热点之一,目前已有大量研究表明lncRNA参与了肿瘤的发生、发展、耐药、转移等生物学进程,并且可以作为肿瘤
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背景:胃癌是世界范围内最常见的消化道恶性肿瘤之一。由于胃癌发病隐匿,患者被诊断时常处于进展期或晚期。尽管近年来早期胃癌的诊断率有所提高,但是进一步的研究胃癌发生发展的生物学基础、开发有效的早期诊断和预后评估指标对于胃癌的治疗仍具有重要意义。长链非编码RNA(lncRNA)是近年来肿瘤领域的研究热点之一,目前已有大量研究表明lncRNA参与了肿瘤的发生、发展、耐药、转移等生物学进程,并且可以作为肿瘤的诊断和预后评估指标。在本研究中,我们通过生物信息学技术,在TCGA数据库中发现linc02657在胃癌中显著高表达,并且与胃癌的不良预后密切相关,因此我们希望进一步探究linc02657在胃癌发生发展中的作用机制。目的:通过生物信息学技术和实验验证linc02657在胃癌组织标本及其对应的癌旁正常组织中的表达水平,并分析linc02657的表达水平与患者临床病理信息之间的关联。构建稳定过表达linc02657的胃癌细胞系,通过实验验证linc02657对胃癌细胞增殖、侵袭、转移能力的影响以及下游潜在的分子机制。方法:1、在TCGA数据库中下载STAD(胃癌)数据库中的转录组测序信息和临床病理信息,通过R分析linc02657在胃癌组织中的表达情况以及与临床病理信息之间的关联。通过GSEA预测linc02657参与的通路2、在签署知情同意书后,收集胃癌患者的手术标本并提取RNA,逆转录后通过实时荧光定量PCR技术检测患者肿瘤组织与正常组织中的linc02657表达水平,并分析其与患者临床病理信息的相关性。3、构建过表达linc02657的胃癌细胞系,通过cck-8实验、克隆形成实验、划痕实验、Transwell实验检测linc02657对胃癌细胞增殖侵袭转移能力的影响。通过Western Blot检测可能受到linc02657调控的下游分子的表达水平。结论:1、在TCGA-STAD数据库中,linc02657在胃癌组织中高表达(p<0.05),逻辑回归结果显示linc02657的高表达与胃癌的转移和临床分期晚期正相关(p<0.05)。多因素COX回归结果显示linc02657是胃癌的独立预后因素。Kaplan–Meier生存分析结果表明高表达linc02657与患者的较短总生存期密切相关(p<0.05)。GSEA分析表明高表达的linc02657可以促进上皮间质转化(EMT)通路和自噬通路。2、在我们收集的41对胃癌标本中,linc02657在胃癌组织中显著高表达(p<0.05),但是并未表现出与临床病理信息的显著相关性。3、体外实验结果显示:过表达linc02657可以显著促进胃癌SGC-7901、MGC-803、BGC-823细胞的增殖、侵袭、转移能力。过表达linc02657可以上调LC3B的水平,促进细胞自噬,还可以上调N-Cadherin的表达水平,促进EMT进程。
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