研究目的1、明确袖状胃切除术对大鼠肥胖、Ⅱ型糖尿病的总体疗效。2、寻找一种经济有效安全,最接近生理状态的构建大鼠Ⅱ型糖尿病模型方式。3、探究袖状胃切除术以后大鼠ghrelin分泌的变化,以及其在糖尿病缓解中的可能作用。4、通过改变进食规律研究袖状胃切除术对于ghrelin分泌节律的影响。研究方法通过查阅文献以及课题组部讨论之后,自行配置了专用的高脂高糖饲料,经过12个月的饲养,成功建成了23只肥胖、Ⅱ型糖尿病大鼠模型,该23只大鼠血糖、糖化血红蛋白等指标均符合T2DM的诊断标准。随机分为两组,一组为袖状胃切除术组(SG组,n=11),另外一组为假手术组(S组,n=10)。术后禁食2天,待大便恢复以后逐渐开始进食流质饮食,于第5日开始进食普食。分别在术后1周、4周、8周时在空腹状态下经眶静脉取血。经ELISA法分别检测AG、TG、胰岛素、血糖、糖化血红蛋白等指标,计算HOMA-IR,AG/TG,AG/UAG等指标,分析袖状胃切除术的糖尿病、肥胖治疗效果。另外从第8周开始改变饮食规律,禁食一天以后开始每日三次投食,分为早中晚三次,每次半小时。改变饮食规律一月后,SG组和S组分别于三餐前和三餐后,以及两餐之间取血,检测AG、TG变化。观察袖状胃切除术后对于ghrelin分泌节律的影响。结果我们课题组经过高脂高糖饲料饲养以后构建的Ⅱ糖尿病大鼠模型非常稳定,总得建模成功率为40%。高脂高糖饲养12个月以后大鼠平均体重超过650g,血糖平均值约8.6mmol/l左右,糖化血红蛋白约6.5%。胰岛素抵抗明显,稳态评估模型计算值约为6,远远超过建模以前。而且经过高脂高糖饲养以后大鼠AG升高,从100ng/l上升到250ng/l,TG下降,从1000ng/l下降到850ng/l。而且AG/UAG的比例相应升高。不论高脂高糖饲养构建Ⅱ型糖尿病模型还是大鼠袖状胃切除术目前都比较成功。SG组大鼠死亡1只,可能由吻合口漏导致腹腔感染引起的。其余大鼠一直存活至实验结束。袖状胃切除术组与假手术组相比体重下降明显,平均体重下降超过200g。而且体重稳定不反弹。袖状胃切除术治疗糖尿病的效果非常理想,在术后一周内越有60%的大鼠糖尿病得到缓解(血糖低于5.6-6.9mmol/l),术后第四周80%的大鼠糖尿病完全缓解(血糖恢复正常、糖化血红蛋白小于6.5%)。而且糖尿病的治疗效果非常稳定,一直到术后第8周时糖化血红蛋白依旧正常。袖状胃切除术后AG、TG下降明显,其中AG从250ng/l下降到100ng/l,TG从850ng/l下降到500ng/l,AG/UAG比例下降。相对于手术组而言假手术组对于糖尿病基本没有治疗效果,而且AG、TG、AG/UAG基本不变。而围手术期内假手术组大鼠体重下降考虑为饮食减少的原因。大鼠改变饮食规律以后可以诱导ghrelin分泌节律改变,产生随饮食改变的周期节律性变化,特别是TG,饮食前升高,饮食后降低的规律非常明显,这种变化与人类十分相似。与实验组相比对照组AG变化与TG相似呈现出非常明显的饮食节律性,而实验组AG变化幅度减小。说明饮食节律的改变影响ghrelin的分泌规律。我们大胆假设,ghrelin的分泌可能存在是一种前馈的调节方式。另外袖状胃切除术后可能发生超负抑制,抑制GOAT活性,使AG分泌维持在低水平,这可能是糖尿病缓解的重要原因。结论1、大鼠长时间喂养高脂高糖饲料可以诱发Ⅱ型糖尿病,但是不同个体时间不同。2、袖状胃切除术是安全、有效的肥胖和Ⅱ型糖尿病的治疗方法。3、袖状胃切除术以后AG、TG特征像改变在袖状胃切除术缓解糖尿病中起到重要作用。4、改变饮食节律可以改变ghrelin的分泌,袖状胃切除术也可以改变ghrelin的分泌节律。肥胖与Ⅱ型糖尿病的发病密切相关,袖状胃切除术可以安全有效的治疗肥胖和Ⅱ型糖尿病,但是相关机制尚不清楚,ghrelin在其中起的作用存在争议,我们在本研究中详细的阐明了大鼠从健康到发生肥胖和Ⅱ型糖尿病的过程中AG、TG的变化,以及手术以后AG、TG的改变,提供了非常有价值的动物实验证据。在本实验中我们发现袖状胃切除术以后AG的改变非常支持卡明斯教授的“超负抑制理论”。说明GOAT在袖状胃切除术缓解Ⅱ型糖尿病中起到重要作用。