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红花注射液是由红花经水煎煮醇沉等工艺加工而成的单方注射液,具有活血化瘀、抗氧化、降脂、抗炎等作用,临床主要应用于预防和治疗冠心病、心肌梗塞等疾病。目前针对红花注射液的临床研究和药理研究报道较多,但基于红花注射液的活性成分的研究报道较少,并主要集中于对羟基红花黄色素A（HSYA）含量与生物活性的研究。为进一步探索其药效物质基础,本研究评价了红花注射液体外延长活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）、抑制血小板聚集以及抗氧化等活性,并以这些生物活性指标为依据,采用活性导向分离方法,对红花注射液的抗凝血活性部位和化学成分进行了研究。本文内容包括以下几个方面:1.以体外延长人正常血浆APTT、PT和抑制血小板聚集为评价指标,分别评价了7个企业生产的红花注射液的体外生物活性;采用清除1,1-二苯基-2-苦肼基（DPPH?）体外筛选模型,研究了红花注射液的体外抗氧化活性;利用福林酚法和AlCl3比色法测定了红花注射液的总多酚和总黄酮含量。结果表明:不同生产企业的红花注射液对APTT具有明显的延长作用（P>0.05）,并呈量效相关性,但对PT作用不显著（P<0.05）,即红花注射液对内源性凝血途径有显著影响,对外源性凝血途径无明显作用;红花注射液对ADP诱导的家兔血小板聚集有显著的抑制作用,以及对DPPH?具有显著的清除作用,并呈量效相关性。2.采用大孔树脂D101层析柱对红花注射液进行了粗分离,并获得4个组分;采用体外生物活性筛选方法评价了各组分的体外生物活性。实验结果表明:四个化学成分群均具有体外延长APTT、PT以及抑制血小板聚集作用;延长APTT、PT作用强弱排序均为Fr4>Fr3>Fr2>Fr1;此外,Fr3组分具有较强的抑制血小板聚集作用和抗氧化活性,且总多酚含量高。3.通过凝胶柱层析与制备液相对Fr4进行了反复分离纯化,并分离得到三个化合物。利用UPLC-MS和核磁共振1H NMR、13C NMR以及标准品比对等方法,对化合物进行了结构鉴定。三个化合物分别为对羟基苯甲醛、对羟基肉桂酸和（8Z）-癸烯-4,6-二炔-1-O-β-D-葡萄糖苷。活性测定结果表明:对羟基肉桂酸延长APTT活性最强,对羟基苯甲醛次之。4.利用高效液相色谱法测定了红花注射液主要化学成分羟基红花黄色素A、对羟基肉桂酸和对羟基苯甲醛的含量。利用Pearson’s法比较分析了红花注射液体外抗凝血、抑制血小板聚集及抗氧化活性与其总黄酮、总多酚含量之间的相关性;比较分析了羟基红花黄色素A含量与体外抗凝血活性之间的量效关系。相关性分析表明:整体来看总黄酮含量与APTT延长率存在一定的相关性、总多酚含量与DPPH?清除率具有良好的相关性;羟基红花黄色素A含量与APTT之间无明显量效关系。结论:红花注射液体外延长APTT活性的化学物质基础可能为红花注射液中的黄酮醇及黄酮醇苷类成分;体外抗氧化活性的化学物质基础可能为多酚类物质。