第一部分IVD节育术的雄犬实验研究目的以成年雄性Beagle犬为实验动物,检测各组犬术前术后精子密度、活率、а-糖苷酶、铜离子和锌离子含量;观察犬睾丸、附睾和输精管组织细胞的形态学变化(光镜和电镜),判断此IVD的节育有效性、安全性和可复性,为下一步动物和临床实验提供依据。材料和方法按照随机、对照的实验原则,选取20只雄性Beagle犬,随机编入假手术组、输精管结扎组、IVD组和复通组,每组5只。采用手刺激法取犬精液4～8ml,将精液行计算机辅助分析(CASA)计算精子密度和各级精子活率。各组分别行假手术、IVD植入术和输精管结扎术,并于术后第1、3、6、12个月取精液检测。-20℃冷藏精浆用于а-糖苷酶、铜离子和锌离子含量的检测。术后第12月时取假手术组、输精管结扎组和IVD组犬睾丸、附睾和输精管组织,HE染色光镜下观察,制作超薄切片电镜下观察;TUNEL法(Termainal deoxy-nucleotidyl Transfetase Mediated Nick End Labeling,TdT介导的dUTP缺口末端标记术)检测睾丸、附睾和输精管细胞凋亡情况。术后12月手术取出复通组各犬输精管内IVD,并于术后第1月,手法刺激取其精液,检测精液中的上述各项指标。结果术前各组犬精液CASA检查各项指标正常。手术过程顺利。术后无感染等并发症发生。术后第1月取精CASA检查发现IVD组和输精管结扎组犬精液中精子密度均为零,即二组Beagle犬都处于无精子状态,节育有效性在IVD组和输精管结扎组相同,均达到100%。假手术组各犬精液CASA检查各项指标值与术前无明显差异。复通组IVD取出手术过程顺利,术后第1月精液CASA检查发现精子密度与各级精子活率与术前复通组统计学上无显著性差异。精浆中а-糖苷酶含量测定在IVD组、复通组和假手术组术前术后无显著性差异;而输精管结扎组术前术后有显著性差异;各组犬精浆铜离子和锌离子浓度术前术后统计学分析无显著性差异。睾丸、附睾和输精管组织标本行光镜和电镜下观察表明假手术组、IVD组各犬三者损伤程度均较输精管结扎组轻微。前二组睾丸组织生精上皮各级细胞正常,附睾管及管腔无明显的扩张,输精管扩张程度较轻或无扩张。而结扎组则睾丸组织曲细精管上皮细胞排列紊乱,细胞量减少,间质较疏松;附睾管及输精管腔扩张明显。同时睾丸、附睾和输精管细胞凋亡实验也表明假手术组、IVD组的睾丸、附睾和输精管细胞凋亡数量显著性少于输精管结扎组。结论实验表明络合铜纳米高分子复合材料IVD与输精管结扎术在术后一年之内达到了同样的节育效果,两者都为100%。此IVD具有良好的组织相容性、安全性,不会对放置局部和全身组织器官造成不良影响。复通手术再通结果表明取出IVD后较容易达到输精管再通,IVD取出术简单易行,容易操作,术后无并发症。第二部分IVD节育术的雄兔实验研究目的以新西兰大耳白兔( New Zealand Big Eared White Rabbit)为实验模型动物,通过各组对大耳白兔术前取精、雌雄配种后雌兔怀孕率实验结果及术后各组兔睾丸、附睾和输精管组织细胞标本切片的光镜检查和凋亡实验来判断此IVD的节育有效性、安全性和可复性,为下一步动物和临床实验提供理论依据。材料和方法雄性新西兰大耳白兔40只,随机编入假手术组、输精管结扎组、IVD组和复通组,每组10只。术前通过假阴道法取精,精液镜下观察。同时选取雌性新西兰大耳白兔40只,随机分为四组,即假手术组、输精管结扎组、IVD组和复通组,以备与相应四组雄兔行配种实验。各组雄兔分别行假手术、IVD植入术和输精管结扎术。术后分别与四组雌性新西兰大耳白兔交配,观察各组雌性新西兰大耳白兔怀孕及分娩情况。术后十二月时复通组行IVD取出手术,与10只雌性新西兰大耳白兔再次进行交配实验,观察雌兔怀孕分娩情况以判断其复通成功率。术后第12月时,手术取假手术组、输精管结扎组和IVD组兔睾丸、附睾和输精管组织,切片HE染色光镜下观察组织细胞形态学变化;TUNEL法检测各组兔睾丸、附睾和输精管细胞凋亡情况。结果术前通过假阴道法取精,精液镜下观察发现各兔精液都有精子,密度及活率正常。各组兔行假手术、IVD植入术及输精管结扎术的手术过程顺利。术后行配种实验后,IVD组、复通组和输精管结扎组怀孕率均为0。假手术组雌兔怀孕率达80%。复通组行IVD取出手术过程顺利,术后无血肿及感染等并发症。复通术后雌雄兔交配,雌兔怀孕率达60%。各兔睾丸、附睾和输精管组织切片光镜下观察发现假手术组、IVD组组织细胞损伤轻微或正常,附睾管及输精管管腔扩张不明显;而输精管结扎组则损伤较为严重,附睾管及输精管管腔扩张明显,纤毛脱落或消失。凋亡实验表明假手术组、IVD组睾丸、附睾和输精管上皮细胞无明显凋亡;而输精管结扎组可见大量细胞凋亡。结论络合铜纳米高分子复合材料IVD的新西兰大耳白兔实验表明络合铜纳米高分子材料IVD具有良好的节育效果,术后一年之内的节育效果与输精管结扎术相同,都达到100%。IVD植入术手术过程简单易掌握。术中出血较少,附睾郁积肿胀程度较输精管结扎术明显减轻。从术后各兔睾丸、附睾和输精管组织切片的光镜观察及凋亡实验结果表明此IVD具有良好的安全性,不会对放置部位局部和邻近生殖器官造成不良影响。复通时IVD取出过程顺利,术后复通成功率高,有着良好的可复性。