柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子表面抗原基因λMZ5-7的克隆和表达

来源 :中国农业科学研究院 中国农业科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhuzi1976
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λMZ5-7基因是柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)第二代裂殖子表面的一个抗原基因,其蛋白具有一定的免疫原性.该文以λMZ5-7基因为研究目标,根据国外已发表的序列, 设计一个对引物,利用RT-PCR技术从E.tenella(上海分离株)第二代裂殖子中扩增出λMZ5-2kf基因.经琼脂糖凝胶电泳检测,将大小与预计分子量一致的片段纯化后连接到 PGEM-T-easy克隆载体中,再转化大肠杆菌JM109感受态细胞,得到的转化子经分子量比较、PCR鉴定和酶切分析筛选阳性克隆.经Western-blotting杂交实验,纯化出的目的蛋白能与兔抗 E.tenella第二代裂殖子抗血清发生反应,说明MZP蛋白是E.tenella第二代裂殖子抗原蛋白,具有一定的免疫原性,为进一步研究重组疫苗创造了一定的条件.
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