【摘 要】
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目的:体外研究多级孔二氧化硅微球（MPSNs）通过负载不同浓度的淫羊藿苷（ICA）对成骨细胞增殖分化的影响,为后续构建纳米复合支架材料应用于骨组织再生提供理论依据。方法:选用含两种不同孔径的MPSMs作为药物载体,利用物理吸附方法将ICA负载于MPSMs上,得到MPSMs-ICA复合物。以MC3T3-E1为细胞模板,碱性磷酸酶染色检测MC3T3-E1细胞的成骨分化能力。以MPSMs为对照组,实验组
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目的:体外研究多级孔二氧化硅微球（MPSNs）通过负载不同浓度的淫羊藿苷（ICA）对成骨细胞增殖分化的影响,为后续构建纳米复合支架材料应用于骨组织再生提供理论依据。方法:选用含两种不同孔径的MPSMs作为药物载体,利用物理吸附方法将ICA负载于MPSMs上,得到MPSMs-ICA复合物。以MC3T3-E1为细胞模板,碱性磷酸酶染色检测MC3T3-E1细胞的成骨分化能力。以MPSMs为对照组,实验组分别为MPSMs负载10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL的ICA组,CCK-8检测各组对MC3T3-E1细胞增殖能力的影响;划痕试验检测各组对MC3T3-E1细胞迁移能力的影响;使用碱性磷酸酶（ALP）试剂盒检测各组ALP的分泌情况;利用茜素红染色的方法对各组的矿化能力进行检测;采用Western Blot方法检测MC3T3-E1细胞成骨分化和矿化相关蛋白BMP2、OPN及相关机制蛋白ERK1/2、P-ERK1/2蛋白的表达。结果:通过成骨诱导培养,与空白组相比诱导组的ALP染色显著加深,该成骨诱导培养基可诱导MC3T3-E1细胞向成骨方向分化。CCK-8检测结果表明,负载不同浓度ICA作用于MC3T3-E1细胞,在48h细胞增殖达到高峰,72h有所下降,且负载40μg/mL的ICA组是促进细胞增殖的最佳浓度,在48h时为最佳作用时间。划痕实验结果可以看出随着药物浓度的增加迁移率逐渐变强,并且负载40μg/mL的ICA组促细胞迁移能力最强,48h划痕基本愈合。ALP试剂盒检测结果表明,同对照组相比负载20μg/mL、40μg/mL的ICA组对MC3T3-E1细胞的ALP活性有显著性提高（P<0.01）。茜素红染色实验结果显示,随着负载药物浓度的增高,促MC3T3-E1细胞矿化能力逐渐增强。Western Blot检测结果显示,随着负载ICA药物浓度的增高对BMP2、OPN、ERK1/2、P-ERK1/2蛋白的表达量也逐渐增高。结论:1.MPSMs具有较好负载ICA的能力。2.负载ICA的MPSMs可促进MC3T3-E1细胞的增殖、迁移、分化和矿化,其机制与上调BMP2和OPN蛋白的表达有关。3.MPSMs负载ICA后促进MC3T3-E1细胞的增殖和分化与ERK1/2信号通路相关。
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