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目的:探究KLF15在胰腺癌中的表达及临床意义,验证KLF15对胰腺癌增殖、侵袭及迁移能力的影响及其作用机制。方法:运用GEPIA分析KLF15在胰腺癌中的表达情况及与预后之间的关系。采用q RT-PCR和免疫印迹实验检测KLF15在20对胰腺癌和癌旁组织及细胞系中的m RNA和蛋白表达水平。分别构建KLF15过表达、干扰慢病毒及阴性对照慢病毒载体,转染胰腺癌MIA Pa Ca-2和PANC-1细胞。采用Cell Counting Kit-8（CCK-8）、平板克隆、EDU和Transwell检测KLF15对胰腺癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。裸鼠皮下成瘤模型验证KLF15在体内对胰腺癌增殖的影响;免疫组化检测KLF15对瘤子Ki67、PCNA等指标的影响。基于TCGA数据库,使用GSEA进行富集分析,寻找KLF15发挥作用的生物学途径;为了检测KLF15对糖酵解代谢相关指标变化的影响,采用q RT-PCR和免疫印迹检测KLF15对糖酵解中关键酶PKM2、LDHA、HK2、GLUT1表达量的变化;糖摄入、乳酸生成、ATP生成、ECAR等实验检测KLF15对胰腺癌细胞糖酵解的影响。基于转录组测序和TCGA共表达关系,寻找KLF15的相关基因;采用Jaspar结合NCBI数据库预测KLF15与ZBTB16之间的转录结合位点。采用q RT-PCR和免疫印迹验证KLF15对ZBTB16m RNA和蛋白表达量的影响;采用双荧光素酶报告实验、CHIP结合q RT-PCR验证KLF15对ZBTB16的转录调控关系;通过设计ZBTB16的si RNA序列,构建si-ZBTB16的瞬时转染细胞株,采用CCK-8、克隆形成和Tran swell检测同时干扰ZBTB16和过表达KLF15较单独上调KLF15对胰腺癌细胞生物学功能的影响。结果:GEPIA数据库显示,KLF15在胰腺癌中呈低表达（P＜0.05）,且KLF15高表达组患者的总生存率（Overall survival）显著高于低表达组（logrank p=0.042）。q RT-PCR结果显示,KLF15在胰腺癌癌旁组织中的表达显著高于癌组织（P＜0.01）,细胞系q RT-PCR及免疫印迹结果表明,KLF15在MIA Pa Ca-2、PANC-1、SW1990等细胞株中的表达量显著低于正常胰腺导管上皮细胞（HPDE）,差异具有统计学意义（P＜0.01）。CCK-8及平板克隆实验结果显示,过表达KLF15显著抑制胰腺癌细胞增殖活性,干扰KLF15的表达可显著促进胰腺癌细胞的增殖能力,差异具有统计学意义（P＜0.05）。EDU实验结果显示,过表达KLF15组增殖细胞阳性率显著低于KLF15下调组（P＜0.05）。Transwell实验结果显示,过表达KLF15后侵袭和迁移过膜细胞数显著低于对照组（P＜0.05）。裸鼠皮下成瘤实验结果显示,上调KLF15后肿瘤体积显著小于对照组。瘤体免疫组化显示,KLF15可显著抑制Ki67、PCNA的表达。GSEA富集结果显示,KLF15低表达组中,糖酵解信号通路显著富集（P＜0.01）。过表达KLF15可显著抑制HK2、PKM2、GLUT1、LDHA的m RNA和蛋白水平,干扰KLF15的表达后HK2、LDHA、PKM2、GLUT1的m RNA和蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）。与对照组相比,上调KLF15后MIA Pa Ca-2和PANC-1细胞胞外酸化率（ECAR）显著降低,同时,胰腺癌细胞的葡萄糖消耗量、乳酸生成、ATP水平显著降低。与此相反,下调KLF15的表达后,上述反应糖酵解水平的指标均明显升高。这些结果表明,KLF15可抑制胰腺癌细胞的糖酵解能力。转录组测序结果表明,过表达KLF15后ZBTB16上调最明显,GEPIA数据库显示,ZBTB16与KLF15相关性最强,相关性评分为0.74。Jaspar预测结果显示,KLF15可与ZBTB16启动子区域的3个转录结合位点结合。q RT-PCR和免疫印迹结果显示,上调KLF15可显著促进ZBTB16的m RNA和蛋白表达水平,而下调KLF15则可显著抑制ZBTB16的表达,差异具有统计学意义（P＜0.01）。双荧光素酶报告基因实验结果显示,ZBTB16启动子区的第3个结合位点突变之后荧光素酶活性值显著下降,差异具有统计学意义（P＜0.05）;CHIP实验结果显示,结合位点3在过表达KLF15后,ZBTB16较对照组显著富集（P＜0.01）;CCK-8、EDU、克隆形成和Transwell实验结果显示,下调ZBTB16和过表达KLF15共转染组可显著逆转单独上调KLF15组对胰腺癌细胞增殖、侵袭及迁移的抑制作用。过表达KLF15同时干扰ZBTB16也可显著逆转单独过表达KLF15对胰腺癌细胞糖酵解功能的抑制作用。结论:1.KLF15在胰腺癌组织及胰腺癌细胞系中低表达,且KLF15的表达量与胰腺癌患者生存预后正相关。2.过表达KLF15可在体内外显著抑制胰腺癌细胞增殖、侵袭及迁移,而干扰KLF15的表达则可促进胰腺癌细胞的增殖及侵袭迁移能力。3.上调KLF15的表达可抑制胰腺癌细胞糖酵解能力。4.KLF15通过转录调控ZBTB16的表达抑制胰腺癌细胞糖酵解,进而抑制胰腺癌增殖、侵袭和迁移能力。