【摘 要】
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目的:通过survivin 反义寡核苷酸转染hep—2 细胞株,探讨对hep—2 细胞株增殖、凋亡、及放疗敏感性的影响。方法:首先在37℃,5﹪CO2和95﹪湿度条件下的二氧化碳培养箱中培养人喉
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目的:通过survivin 反义寡核苷酸转染hep—2 细胞株,探讨对hep—2 细胞株增殖、凋亡、及放疗敏感性的影响。方法:首先在37℃,5﹪CO2和95﹪湿度条件下的二氧化碳培养箱中培养人喉鳞状细胞癌hep—2 细胞株,取对数生长期细胞,分别用于以下各步实验。（1）、反义寡核苷酸转染hep—2 细胞转染率的测定取对数生长期细胞进行转染,以脂质体法分别转染4 个浓度梯度的survivin 反义寡核苷酸100,200,400,600nmol 进入细胞。于转染后6 小时取转染细胞于荧光倒置显微镜下观察并制成单细胞悬液,于流式细胞仪进行检测。（2）、结晶紫法检测基因转染后对hep—2 细胞增殖的抑制情况,取对数生长期hep—2 细胞进行转染,将实验分成五组,Ⅰ组:以无血清RPMI-1640 培养基代替转染复合物作为空白对照;Ⅱ组:100nmol/ml 转染组;Ⅲ组:200 nmol/ml 转染组;Ⅳ组:400 nmol/ml 转染组;Ⅴ组:600 nmol/ml 转染组。每组设3 个平行孔,置37℃5﹪CO2 培养箱中孵育18-24h 至细胞85-90﹪汇板进行转染。转染后24h,去除孔内培养基,加入结晶紫溶液,37℃孵育30min,倒掉结晶紫,加入脱色液,振荡脱色,于酶标仪中检测光密度（OD）值。（3）、RT—PCR 法检测基因转染后
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