普氏蹄蝠(Hipposideros pratti)微卫星位点的筛选及交叉种扩增

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微卫星DNA是目前被广泛采用的一类分子标记,相关技术的成熟使我们获取微卫星标记的成功率越来越高。本文采用微卫星序列富集法构建了普氏蹄蝠的(AC)二碱基重复的基因组富集文库,从中先后筛选到16个微卫星位点标记,并利用这些微卫星位点对来自四川地区的一个自然种群(96个个体)进行多态性分析,分型结果显示有4个位点显示为单态位点,3个位点的分型结果无法正确判读,均舍去。余下的9个位点都具有较高的多态性,等位基因总数为91,每个位点的等位基因4-14个不等,平均值为10.1。观察杂合度在0.375到0.966之间,期望杂合度从0.513到0.866。其中,位点PB12、P9及P02偏离了哈迪.温伯格平衡(adiustedα=0.0056,k=9,Bonferroni检验),Micro-checker v2.2.3分析显示偏离原因是无效等位基因的存在。每个位点之间没有显著的连锁关系。由于微卫星分子标记在近缘种中具有较高的通用性,我们还利用9个大蹄蝠微卫星位点对普氏蹄蝠进行通用性扩增,其中有5个位点显示了稳定扩增及高度的多态性。因此,这14个多态位点将便于普氏蹄蝠种群遗传结构及保护策略等领域的研究。另外,从普氏蹄蝠筛选的9个多态位点在同属同科近缘种中进行了交叉物种扩增,其中8个位点显示了较高的通用性,为近缘物种种群遗传学研究提供了更多的分子标记。
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