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目的:探讨熊果酸与紫杉醇对人胃癌BGC-823细胞作用及协同作用机制。
方法:①采用双向电泳及飞行质谱技术研究熊果酸作用胃癌BGC-823后，细胞蛋白质组表达差异。②构建人髓样分化因子88(MyD88)真核表达载体。③将MyD88表达载体稳定转入BGC-823细胞，获得MyD88高表达的人胃癌BGC-823/MyD88细胞株。④MTT比色法检测紫杉醇对MyD88不同表达水平的BGC-823细胞的抑制作用，以及熊果酸预处理后BGC-823细胞对紫杉醇的敏感性。⑤流式细胞术观察紫杉醇作用后两种细胞的细胞周期改变。⑥检测紫杉醇作用于转染前后细胞Caspase-3蛋白表达水平改变；以及熊果酸、紫杉醇联用后上述蛋白表达水平的改变。
结果:①双向电泳及飞行质谱技术研究显示熊果酸引起人胃癌BGC-823细胞的细胞保护性蛋白-葡萄糖调节蛋白78(GPR78)和凋亡调节蛋白-钙网蛋白(CRT)表达上调。②成功构建人MyD88真核表达载体。③完成转染并获得了高表达MyD88的细胞株BGC-823/MyD88。④紫杉醇能抑制人胃癌BGC-823细胞和BGC-823/MyD88细胞的生长和增殖，药物抑制率在0～100nmol/L范围内与药物浓度呈正相关，并且BGC-823/ MyD88细胞对紫杉醇敏感性降低。熊果酸预处理可以增强紫杉醇对BGC-823细胞增殖的抑制作用(P<0.01)。⑤熊果酸可以通过降低MyD88表达水平来增强紫杉醇对BGC-823细胞的抑制作用(P<0.05)。⑥紫杉醇可使BGC-823和BGC-823/MyD88的细胞周期停滞在G2/M期。⑦经10nmol/L紫杉醇处理后，BGC-823细胞Caspase-3活性显著提高(P<0.05)，而BGC-823/MyD88细胞变化不明显(P>0.05)；熊果酸与紫杉醇联用组Caspase-3活性降低，与单纯使用紫杉醇相比有显著性差异(P<0.05)。
结论:①蛋白组学研究表明，熊果酸可以引起胃癌BGC-823细胞中GPR78和CRT表达上调。②MyD88可以作为人胃癌BGC-823细胞株的紫杉醇耐药标志物。③熊果酸可以通过降低MyD88的表达水平而增强胃癌BGC-823细胞对紫杉醇的敏感性。