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烟草花叶病毒(Tobacco Mosaic Virus，TMV)是一类经常危害烟草生产及其它农业生产的植物病毒。本实验目的是获得能够稳定检测烟草花叶病毒(TMV)的单克隆抗体，为进行TMV的快速检测提供有力的工具。
采用RT-PCR的方法，从烟草中提取其总RNA后从中获取烟草花叶病毒(Tobacco Mosaic Virus，TMV)衣壳蛋白相关基因片段。并将此片段增加His-6标签后克隆到表达载体pET-32a上，转化大肠杆菌菌株BL21，筛选稳定表达重组蛋白的菌株进行诱导表达。将所得到的重组蛋白进行纯化，并与提取的天然烟草花叶病毒颗粒一起作为免疫抗原。
用以上抗原免疫所得的Balb/c小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞系SP2/0融合，经过筛选，共获得14株能稳定分泌抗体的细胞株，经鉴定14株细胞所分泌的抗体亚类为IgG1型，抗体轻链均为K型。经过rProteinA纯化14株IgG1型杂交瘤细胞所制备的腹水，经过鉴定抗体的分子量在149.36-157.23kD之间，抗体纯度在80％以上。经ELISA测定，14株抗体均与TMV衣壳重组蛋白和TMV病毒有良好特异性反应。用这些抗体经免疫层析初步检测，其结果表明2A7b和3DTa抗体可用于TMV的快速检测。后续工作需要进一步优化这些抗体以达到对TMV的快速检测。