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研究背景:线粒体是正常细胞能量代谢的主要场所,而能量代谢异常则是肿瘤细胞最先出现的生物学标志。细胞恶性转化过程中伴随着能量代谢的重编程,其中最典型的是在有氧条件下肿瘤细胞也以糖酵解供能(即Warburg效应或有氧糖酵解)为主。一般认为肿瘤细胞依赖有氧糖酵解供能与糖酵解途径异常活化及(或)线粒体生物合成过程不可逆损伤密切相关。但近年来许多研究表明,一些肿瘤细胞仍然具有通过线粒体氧化磷酸化作用合成ATP的能力,例如在白血病和淋巴瘤中肿瘤细胞以线粒体的解耦连蛋白(Uncoupling protein,UCP)促进脂肪酸氧化(Fatty acid oxidation,FAO)提供ATP为优势供能途径。而在弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)中,2005年就有科学家利用全基因组序列分析和多态性聚类分析的方法将DLBCL分为以线粒体功能基因过表达为特征的氧化磷酸化(OxPhos)亚型;伴随炎性细胞和抗原递呈基因过表达的宿主反应HR亚型和BCR信号通路基因富集的BCR/扩增亚型。2012年,CaroP等人根据肿瘤能量代谢异质性更是将DLBCL直接分为氧化磷酸化(OxPhos)亚型和非氧化磷酸化(non-OxPhos)亚型,在氧化磷酸化亚型中出现线粒体氧化磷酸化相关基因的富集且更依赖于脂肪酸β氧化(Fatty acid β-oxidation,FAO)提供能量,在OxPhos-DLBCL细胞中过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARγ)的转录异常活跃是肿瘤细胞依赖FAO供能的原因之一,且PPARy通过影响FAO过程催化酶的转录水平来促进OxPhos-DLBCL细胞的能量生成,PPARγ缺失则可以杀死依赖FAO供能的OxPhos-DLBCL细胞,但具体机制尚不清楚。本研究通过组织学实验、分子细胞生物学和代谢学等技术和方法,去探究PPARγ在DLBCL能量代谢中的作用,如与线粒体氧化磷酸化以及线粒体自身稳定性是否相关;去乙酰化修饰对PPARγ自身的影响;DLBCL患者组织样本和正常淋巴组织中PPARy的表达差异,这种差异是否与预后有关。结果显示:(1)DLBCL中不同的细胞株确实存在着能量代谢的差异,且根据此差异,可以将DLBCL分成氧化磷酸化亚型和非氧化磷酸化亚型;(2)通过生物信息学分析发现DLBCL中的PPARy明显高于正常淋巴组织,而细胞蛋白水平检测发现在氧化磷酸化亚型的细胞株中PPARγ水平异常升高,使用PPARγ抑制剂后,发现FAO过程中的相关作用酶转录水平降低,且能杀死DLBCL肿瘤细胞;(3)同时PPARγ本身还受到去乙酰化修饰的影响,在HDAC3被抑制的情况下,PPARγ出核并集中在线粒体上,但在线粒体上是否有具体意义仍在进一步探索;(4)通过对124例DLBCL病例样本和20例正常淋巴结样本进行免疫组化实验,分析PPARγ在DLBCL患者中的分布情况,对免疫组化结果进行半定量分析和卡方检验,并统计预后,发现PPARγ表达异常升高的患者预后差,即PPARy与患者预后成负相关。因此,本研究证实了 PPARy通过促进FAO来增强OxPhos-DLBCL细胞的生长,且与DLBCL患者的预后成负相关。