论文部分内容阅读
化疗在乳腺癌综合治疗中的具有关键作用。新辅助化疗是针对局部晚期乳腺癌患者在局部治疗之前进行的全身性化学治疗。目前,新辅助化疗疗效的评估尚缺乏良好的预测指标。本团队前期针对新辅助化疗患者血液中循环肿瘤细胞(Circulating tumorcells,CTC)进行检测,发现部分患者在接受新辅助化疗后CTC数量存在明显差异。通过抗体芯片技术,我们对CTC数量不同的患者血浆进行高通量分析得到多种差异细胞因子,其中趋化因子CCL5在不同组的患者中差异显著。进一步我们对比了新辅助化疗后病理反应不同的乳腺癌患者血浆中CCL5水平,发现在新辅助化疗疗效较好的患者体内的CCL5水平下降明显。体外实验中,利用外源性CCL5干预乳腺癌MCF-7细胞和ZR-75-1细胞后,乳腺癌细胞的侵袭迁移能力明显上升,表阿霉素对其生长的抑制作用明显减弱。利用外源性CCL5及表阿霉素处理乳腺癌细胞分为四组:对照组、CCL5处理组、表阿霉素处理组和联合处理组,检测各组上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关标志物及转录因子的表达水平。mRNA水平上,外源性CCL5对乳腺癌细胞波形蛋白(Vimentin)基因的表达上调。表阿霉素处理组上皮型标志物CDH1基因表达水平发生明显下调。经过CCL5干预的乳腺癌细胞,接受表阿霉素处理后MCF-7CCL5+E组CDH1基因表达明显低于MCF-7+E组,而MCF-7CCL5+E组Vimentin表达明显高于MCF-7+E组。蛋白水平CCL5处理后的MCF-7细胞vimentin表达升高。ZR-75-1细胞经过CCL5处理后,E型钙黏蛋白(E-cadherin)表达下降,vimentin表达升高。经过表阿霉素处理后,两细胞株E-cadherin表达下降,vimentin表达升高。在CCL5存在的情况下,MCF-7CCL5在表阿霉素刺激后E-cadherin表达下降,vimentin表达上升。经过CCL5和表阿霉素处理的乳腺癌细胞发生埃兹蛋白(ezrin)磷酸化上调,同时皮动蛋白(cortactin)表达升高。当两个因素同时存在时,磷酸化ezrin蛋白和cortactin蛋白上调更为明显。CCL5可以通过促进乳腺癌细胞发生EMT导致其对表阿霉素产生耐药,在新辅助化疗疗效的预测中具有一定的价值。