梅毒患者外周血Th1/Th2类细胞因子和T细胞亚群的检测及临床意义

来源 :山东省医学科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a6231423
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梅毒系由梅毒螺旋体(Treponema Pallidum,TP)引起的一种全身性、慢性的性传播性疾病。梅毒可严重影响身体健康,它可以使几乎全身各种组织器官发生病变,感染早期主要侵犯皮肤、粘膜,晚期可侵犯心血管及中枢神经系统,导致严重的后遗症。人感染TP后的免疫机制非常复杂,常不能完全清除,造成其潜伏体内形成长期感染。不同病期梅毒患者存在一系列细胞免疫功能失调和细胞免疫抑制现象,可表现为局部及外周血的Th/Ts比例下降,Th1/Th2的失衡及其细胞因子分泌失调,血清可溶性白细胞介素2受体水平的变化等。研究梅毒患者免疫功能的状态改变,对梅毒的预防和转归均有重要意义。为进一步探讨Th1和Th2类辅助性T细胞在梅毒发病中的作用,本文以IFN-γ和IL-2代表Th1类细胞因子,IL-4代表 Th2类细胞因子,通过ELISA方法对一、二期梅毒患者,血清固定患者、经治疗痊愈患者及健康对照者外周血进行检测,运用流式细胞仪分析各组T细胞亚群分布情况,并采用RT-PCR技术检测一、二期梅毒患者PBMC中Th1和Th2类细胞因子mRNA表达情况。   目的:   探讨不同病程梅毒患者外周血单个核细胞(PBMC)中Th1类细胞因子(IL-2、IFN-γ)和Th2类细胞因子(IL-4)水平变化,分析梅毒螺旋体对机体外周血中T淋巴细胞亚群的影响,并采用RT-PCR技术,检测一、二期梅毒患者PBMC中Th1类和Th2类细胞因子mRNA表达情况,从而了解梅毒患者外周血Th1/Th2类细胞免疫及外周血中各T淋巴细胞免疫表型的特点。   方法:   1.双抗体夹心ELISA法分别检测一、二期梅毒患者、治疗后血清学阴转患者、血清固定患者及健康对照者血清中IL-2、IFN-γ、IL-4水平。   2.应用流式细胞仪,分析以上各组外周血T淋巴细胞亚群(CD3、CD4、CD8、CD4/CD8)比例情况。   3.采用RT-PCR技术,检测15例一期梅毒患者,31例二期梅毒患者PBMC中Th1(IL-2、IFN-γ)和Th2(IL-4、IL-10)类细胞因子mRNA表达,同时以梅毒检测阴性的25例健康人作为对照组。   结果:   1.白细胞介素2结果分析及组间比较:   1.1各梅毒组与正常对照组血清白细胞介素2水平比较:   一期梅毒组与正常对照组相比,血清IL-2水平较正常组为高,差异有显著性意义(P<0.05);二期梅毒组与正常对照组相比,血清IL-2水平降低,差异有显著性意义(P<0.01);血清固定组与正常对照组相比,血清IL-2水平较正常组低,差异具有显著性意义(P<0.05);治愈组与正常对照组相比,血清IL-2水平无显著性差异(P>0.05)。   1.2各梅毒组间血清白细胞介素2水平比较:   一期梅毒组的血清IL-2水平显著高于二期梅毒组、血清固定组和治愈组的血清IL-2水平(P<0.01);而二期梅毒组的血清IL-2水平明显低于血清固定组的IL-2水平(P<0.01)。   2.白细胞介素4结果分析及组间比较:   2.1各梅毒组与正常对照组血清白细胞介素4水平比较:   一、二期梅毒组与正常对照组相比,血清IL-4水平均升高,差异有显著性意义(P<0.05);血清固定组和治愈组与正常对照组相比,血清IL-4水平无显著性差异(P>0.05)。   2.2各梅毒组和血清白细胞介素4水平比较:   二期梅毒组的血清IL-4水平显著高于其它各组的血清IL-4水平(P<0.05);一期梅毒组的血清IL-4水平高于血清固定组和治愈组的血清IL-4水平(P<0.05);治愈组和血清固定组之间的血清IL-4水平差异无显著性意义(P>0.05)。   3.IFN-γ结果分析及组间比较:   3.1各梅毒组与正常对照组血清IFN-γ水平比较:   一、二期梅毒组与正常对照组相比,血清IFN-γ水平均较正常组为高,差异有显著性意义(P<0.05);血清固定组及治愈组与正常对照组相比,血清IFN-γ水平无显著性差异(P>0.05)。   3.2各梅毒组间血清IFN-γ水平比较:   一期梅毒组的血清IFN-γ水平显著高于二期梅毒组、血清固定组和治愈组的血清IFN-γ水平,差异有显著性意义(P<0.05);二期梅毒组的血清IFN-γ水平高于血清固定组和治愈组的血清IFN-γ水平,差异有显著性意义(P<0.05);血清固定组与治愈组之间差异无显著性意义(P>0.05)。   4.RT-PCR检测一、二期梅毒组PBMC中Th1和Th2类细胞因子mRNA表达结果分析:   4.1一、二期梅毒组PBMC中Th1类细胞因子(IL-2、IFN-γ)及Th2类细胞因子(IL-4、IL-10)mRNA阳性率与正常对照组相比较:   与正常对照组相比,一期梅毒组PBMC中Th1类细胞因子(IL-2、IFN-γ)mRNA阳性率显著升高(P<0.05),二期梅毒组Th2类细胞因子(IL-4、IL-10)mRNA阳性率显著升高(P<0.05)。   4.2一、二期梅毒组之间PBMC中Th1类细胞因子(IL-2、IFN-γ)及Th2类细胞因子(IL-4、IL-10)mRNA阳性率比较:   一期梅毒组IFN-γ mRNA阳性率较二期梅毒组显著升高;一期梅毒组PBMC中Th1类细胞因子(IL-2、IFN-γ)mRNA表达强度较二期梅毒组显著升高(P<0.01),而Th2类细胞因子(IL-4、IL-10)mRNA表达强度则显著减低(P<0.01)。   5.流式细胞仪结果分析:   5.1一、二期梅毒组及对照组CD3、CD4、CD8阳性淋巴细胞比例及CD4/CD8比值之间的组间比较:   一期梅毒组CD8阳性淋巴细胞比例与对照组的检测结果相比,差异无显著性意义(P>0.05),CD3、CD4阳性淋巴细胞比例及CD4/CD8比值较对照组增高,差异有显著性意义(P<0.05);二期梅毒组CD3、CD4及CD8阳性淋巴细胞比例与对照组的检测结果相比,CD3及CD4淋巴细胞阳性率均低于对照组,差异有显著性意义(P<0.05),而CD8淋巴细胞阳性率高于对照组,差异有显著性意义(P<0.05),CD4/CD8比值低于对照组,有显著性差异(P<0.05);一、二期梅毒组之间比较:一期梅毒组CD3、CD4阳性淋巴细胞及CD4/CD8比值高于二期梅毒组,而CD8淋巴细胞阳性率低于二期梅毒组,差异均有显著性意义(P<0.05)。   5.2血清固定组外周血CD3、CD4、CD8阳性淋巴细胞及CD4/CD8比值与对照组比较:   血清固定组外周血CD3及CD4淋巴细胞阳性率低于对照组,差异有显著性意义(P<0.05);而CD8淋巴细胞阳性率高于对照组,差异有显著性意义(P<0.05);CD4/CD8比值低于对照组,有显著性差异(P<0.05)。   5.3梅毒治愈组CD3、CD4、CD8阳性淋巴细胞比例及CD4/CD8比值与对照组比较:   两组比较,CD3、CD4及CD8阳性淋巴细胞比例及CD4/CD8比值,差异均无显著性意义(P>0.05)。   结论:   1.梅毒患者外周血中Th1/Th2类细胞因子的平衡失调,由一期梅毒的Th1类细胞因子占优势向Th2类细胞因子转换;对梅毒的发病机制作了进一步阐释,也为对梅毒患者在常规驱梅治疗的基础上加用免疫调节剂(如干扰素、白介素等)进行综合治疗提供了依据;检测Th1/Th2类细胞因子水平和Th1/Th2类细胞因子mRNA的表达对评价梅毒患者的免疫状况和指导临床对患者进行免疫调节治疗有一定的应用价值。   2.一、二期梅毒患者和血清固定梅毒患者存在细胞免疫不平衡和免疫抑制;一期梅毒CD3、CD4阳性淋巴细胞增高利于梅毒螺旋体的清除;二期梅毒CD3、CD4阳性淋巴细胞减低降低了机体清除梅毒螺旋体的能力,而CD8阳性淋巴细胞增高降低了机体产生抗梅毒抗体的能力;梅毒血清固定患者存在细胞免疫功能低下,在梅毒患者血清固定病程中起着一定的作用;临床上在梅毒的治疗过程中,应监测机体的免疫状态,调节和增强机体免疫特别是细胞免疫能力,来加速梅毒患者的治愈。
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