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第一部分巨噬细胞特异性腺苷激酶基因敲除在肾脏纤维化中的作用目的:探讨巨噬细胞特异性腺苷激酶基因敲除在肾脏纤维化中的作用及机制。方法:选取6～8周龄体重22-28g成年雄性野生组以及特异性腺苷激酶基因敲除C57BL/6小鼠各12只。分为WT Ctrl组、ADK-/-Ctrl组、WT UUO组以及ADK-/-UUO组,每组各6只。四组小鼠在UUO术后继续饲养14天而后牺牲,留取肾组织标本。Masson染色观察肾脏纤维化情况,Western Blot方法检测α-SMA及E-cadherin蛋白表达情况,F4/80直接免疫荧光染色检测肾脏巨噬细胞浸润的程度,i NOS、MR以及Arg-1免疫组化染色观察M1和M2型巨噬细胞的表达情况。结果:（1）肾脏病理结果显示UUO手术组的小鼠比假手术组小鼠肾脏结构紊乱、肾小管细胞空泡样变性、脱落、官腔扩张,肾小管基底膜裸露,间质炎细胞浸润增多,出现纤维化。在UUO手术之后14天,ADK-/-UUO组小鼠间质纤维化比WTUUO组更重。（2）Western Blot结果显示,UUO组小鼠α-SMA明显高于假手术组（P<0.05）,肾小管上皮细胞标志物E-cadherin表达下降（P<0.05）;UUO术后,特异性巨噬细胞ADK基因敲除的小鼠比野生组纤维化程度更重,α-SMA表达增加（P<0.05）,E-cadherin表达减少（P<0.05）。（3）F4/80直接免疫荧光染色示UUO术后的小鼠的巨噬细胞浸润明显增加（P<0.05）,M1型巨噬细胞标志物i NOS在UUO术后表达明显增加（P<0.05）,ADK-/-UUO组小鼠的i NOS表达低于WT UUO组（P<0.05）。M2型巨噬细胞标志物MR和Arg-1在UUO术后表达均增加（P<0.05）,与WT UUO组相比,ADK-/-UUO组小鼠的MR和Arg-1表达增加（P<0.05）。结论:特异性巨噬细胞ADK基因敲除可增加慢性肾脏纤维化,可能与增加巨噬细胞的浸润、促进巨噬细胞向M2型转化有关。第二部分抑制腺苷激酶对RAW264.7巨噬细胞的影响目的:探讨腺苷激酶抑制（ADKI）剂对巨噬细胞的影响及其机制。方法:体外培养的RAW264.7巨噬细胞分为Control组、ADKI（1u M）组、LPS（5ug/L）组、LPS（5ug/L）+ADKI（1u M）组,干预24h后收集细胞蛋白和RNA。Western Blot方法检测i NOS和MR蛋白的表达,PCR检测i NOS、MR、IL-1β、TNF-α、IL-10、MCP-1基因的表达情况。Transwell实验分为Control组和ADKI（1u M）组,迁移8小时后观察巨噬细胞迁移情况。高相液色谱法检测细胞外腺苷水平。Seahorse能量检测仪测定Control组和ADKI（1u M）组细胞的耗氧量（OCR）以及ECAR。结果:（1）LPS刺激的巨噬细胞呈浓度依赖性增加M1型巨噬细胞标志物i NOS的表达。（2）ADKI可促进RAW264.7巨噬细胞的迁移（P<0.05）。（3）ADKI可抑制LPS导致的M1巨噬细胞标志物i NOS基因的表达以及促炎因子IL-1β、TNF-α的表达（P<0.05）,增加抗炎因子IL-10基因的表达（P<0.05）,同时ADKI可增加巨噬细胞MCP-1的表达（P<0.05）。ADKI可抑制LPS导致的M1型巨噬细胞标志性蛋白i NOS的表达（P<0.05）,增加MR的蛋白表达（P<0.05）。（4）ADKI干预后可增加细胞外腺苷水平的表达（P<0.05）。（5）线粒体能量代谢检测显示,ADKI干预的巨噬细胞基础耗氧量（OCR）以及最大耗氧量高于Control组（P<0.05）,但细胞外酸化率（ECAR）低于Contol组（P<0.05）。结论:ADKI可促进巨噬细胞的迁移,可能通过抑制糖酵解途径从而促进向巨噬细胞向M2型的转化。第三部分M2型巨噬细胞在糖肾患者肾脏中的表达情况目的:探讨M2型巨噬细胞在糖尿病肾脏病患者肾脏中表达情况。方法:选取2015年1月至2017年6月在南京医科大学第一附属医院肾内科行肾活检明确诊断的糖尿病肾脏病（diabetic kidney disease,DKD）患者52例,行肾组织免疫荧光染色,采用CD68和MR共定位标记M2型巨噬细胞的表达。收集患者的临床和病理资料,分析M2型巨噬细胞的浸润与临床参数间的相关性,比较不同病理分期M2型巨噬细胞浸润情况。病理医生根据肾小管损伤间质纤维化（IF/TA）程度对入组患者进行IF/TA评分,比较不同等级IF/TA评分患者的M2型巨噬细胞浸润情况。结果:（1）52例糖尿病肾脏病患者,其中男性36人,女性16人,平均年龄为51.0±12.71岁,平均e GFR水平为61.2±35.02ml/min/1.73 m2。17人（32.7%）出现肾病综合征。22例患者为糖尿病肾脏病II期,9例患者为IIa期,13例患者为IIb期,21例为糖尿病肾脏病III期,剩余9例为糖尿病肾脏病IV期。（2）所有入组糖肾患者均有M2型巨噬细胞的浸润。（3）每高倍镜视野下M2型巨噬细胞的个数与血红蛋白（P<0.01,r=0.386）、e GFR（P<0.01,r=0.381）、血清总蛋白（P<0.01,r=0.365）、血清白蛋白（P<0.05,r=0.326）呈负相关,与24小时尿蛋白（P<0.01,r=0.412）、血清肌酐（P<0.05,r=0.342）、尿素氮（P<0.01,r=0.405）、以及空腹尿液PH值（P<0.05,r=0.384）呈正相关。（4）病理分期III或IV期糖肾患者浸润的M2型巨噬细胞个数明显多于IIa或者IIb期（P<0.05）,但III期和IV期两组糖肾患者其M2型巨噬细胞个数无明显差异。IF/TA评分为2或3组的巨噬细胞浸润高于IF/TA评分为1组的糖肾患者（P<0.05）,IF/TA评分为3组患者巨噬细胞浸润比评分为2组患者多（P<0.05）。结论:M2型巨噬细胞在糖肾病肾脏病中普遍存在,在IIa期即可出现浸润。M2巨噬细胞浸润的与糖肾病脏病损伤进程呈正相关。病理损伤以及间质纤维化重的糖尿病肾脏病患者M2型巨噬细胞浸润增多。