人类巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)在人群中普遍感染,对婴幼儿及免疫低下人群造成严重疾病甚至死亡,因此HCMV感染一直是全球公共健康关注的焦点。1型糖尿病是一种自身免疫疾病,由于患者的免疫系统缺陷,更容易发生感染性疾病。有研究表明,HCMV感染使1型糖尿病人死亡率上升。针对该病毒感染,目前还没有获得批准的临床使用的疫苗。本实验室在前期研究中以小鼠为动物模型,证明巨细胞病毒灭活疫苗可以对健康小鼠提供理想的免疫保护。本研究以化学试剂诱导的1型糖尿病小鼠为模型,探讨糖尿病小鼠是否对巨细胞病毒更加易感以及巨细胞病毒灭活疫苗是否对罹患糖尿小鼠提供有效的保护。我们采用注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)方法诱导小鼠1型糖尿病。用不同剂量的小鼠巨细胞病毒(Murinecytomegalovirus,MCMV)分别感染健康小鼠和糖尿病小鼠,定时取小鼠脾脏检测脾脏病毒滴度,并统计存活率以计算该病毒的半数致死剂量(LD50);另一实验中,用相同剂量的MCMV分别感染健康小鼠和糖尿病小鼠,检测不同时间小鼠的脾脏和唾液腺的病毒滴度。结果表明,在健康小鼠中该病毒的LD50约为1.64×105 PFU,而在糖尿病小鼠中约为0.24×105PFU;以同一剂量的病毒感染小鼠,随着感染时间的增加,糖尿病小鼠的脾脏和唾液腺病毒滴度都显著高于健康小鼠。糖尿病小鼠相比健康小鼠对巨细胞病毒更加易感,且难被机体清除。同时,在本研究中我们通过在小鼠成纤维细胞NIH-3T3上扩增病毒、福尔马林灭活及超离纯化的方法制备得到MCMV灭活疫苗。采用腹腔注射的方式分别免疫糖尿病小鼠和健康小鼠。疫苗接种选用0.25ug、1ug和4ug三个不同剂量,单独免疫或加入MF59佐剂或铝佐剂共同免疫。小鼠共免疫2次,间隔三周。每次免疫后第20天取小鼠血清,通过ELISA法检测IgG抗体滴度。在第二次免疫三周后,用致死剂量的唾液腺增毒的MCMV(SG-MCMV)腹腔注射的方式感染小鼠。在攻毒后21天内记录小鼠的死亡情况并测定小鼠体重丢失率,以及检测攻毒后第4天小鼠的脾脏病毒滴度和第21天唾液腺病毒滴度。结果表明,与健康小鼠相比,糖尿病小鼠的血清IgG抗体应答较弱。要在糖尿病小鼠中诱导出与健康小鼠相同水平的抗体应答,疫苗剂量应是健康小鼠的4倍以上。在灭活疫苗中添加MF59或Al(OH)3佐剂均能显著提高糖尿病小鼠和健康小鼠的血清抗体滴度。疫苗单独免疫时,4.0μg剂量可对健康小鼠提供有效保护,但不能对糖尿病小鼠提供保护;在疫苗中加入Al(OH)3佐剂,则1ug剂量可对健康小鼠提供有效保护,4ug剂量可对糖尿病小鼠提供有效保护;在疫苗中加入MF59佐剂时,0.25ug剂量即可对所有小鼠提供有效保护,健康小鼠存活率达到100%,糖尿病小鼠存活率达到50%,4ug剂量时存活率提高到87%。可见,巨细胞病毒灭活疫苗添加佐剂可以有效保护糖尿病小鼠抵抗致死量病毒的攻击。