目的：应用双向凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)及基质辅助激光解吸离子电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术,研究多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者骨髓上清中差异表达蛋白,并与其他血液系统恶性肿瘤患者及正常对照比较,筛选MM特征性蛋白质标记物,为完善MM的临床诊断、鉴别诊断指标提供实验室参考依据。　　 方法：收集MM患者、其他血液系统恶性肿瘤患者及正常对照骨髓上清标本为研究对象。标本去除白蛋白和免疫球蛋白IgG,应用2-DE技术分离3组骨髓上清样本。电泳后银染,用ImageMaster 2D platinum 5.0图像分析软件进行比较,以差异倍数在3倍以上的蛋白质点作为候选差异表达蛋白。利用MALDI-TOF-MS质谱对候选差异表达蛋白做肽质量指纹图谱和MS/MS质谱鉴定,NCBInr数据库检索相关蛋白质。　　 结果：获得了较好的MM组、疾病对照组及正常对照组骨髓上清2-DE图谱。经双向凝胶电泳软件分析,发现MM组与正常对照组之间有47个差异蛋白点,与疾病对照组之间有58个差异蛋白点。选择重复性较好的41个点进行MALDI-TOF-MS分析,得到41张PMF图,并对其中部分前体离子进一步MS/MS鉴定。结果经数据库检索发现,MM组患者与疾病对照组和正常对照组比较,5种蛋白高表达,3种蛋白低表达。高表达蛋白包括免疫球蛋白J链和轻链、前病毒遗传的Gag多聚蛋白、与半抗原结合的含成熟氧(末)端的催化抗体。低表达蛋白包括血红蛋白、结合珠蛋白Hp2及锌-α2糖蛋白。　　 结论：2-DE/MS联用技术可对人骨髓上清中蛋白质成分进行筛选。MM患者与疾病对照组和正常对照组相比,骨髓上清的蛋白质组表达存在明显差异。这些差异表达蛋白的发现有助于理解MM的发生、发展机制,为进一步完善MM诊断、鉴别诊断指标提供了科学参考依据。