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本研究论文以中华眼镜蛇蛇毒中神经生长因子的分离纯化为目的，以广东产中华眼镜蛇粗毒为开发对象，用不同的色谱介质联用的方法进行工艺研究，寻找一种可以简单、快速、分离效果好且可几乎线性放大的纯化工艺。论文的研究工作为中华眼镜蛇蛇毒中NGF的工业化生产以及蛇毒的综合利用开辟了新的途径。 论文在实验、研究过程中，采用了6种不同的色谱介质进行组合，共设计了5种不同的分离方案对中华眼镜蛇蛇毒NGF进行纯化，实验发现采用DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析与Sephadex G50凝胶过滤层析联用的两步色谱法可以从蛇毒中得到纯度可达药用标准的目标产品。此工艺较传统方法具有分离速度快、工艺简单、可线性放大的特点。色谱条件优化实验确定阴离子的色谱条件为：洗脱流速0.5mL／min，洗脱液A为0.05mol/L PBS，pH8.5，洗脱液B为0.25mol/LNaCl+0.05mol/L PBS，pH8.5，洗脱程序为等度洗脱+线性梯度洗脱+等度洗脱的淋洗方式。凝胶过滤层析的色谱条件为：洗脱流速0.9mL／min，洗脱液A为0.05mol/L PBS，pH7.5，洗脱程序为等度洗脱。纯化后含NGF的蛋白溶液经Brodford法测定蛋白质的浓度为16ng／mL，回收率为0.49％；以凝胶过滤和反相两种高效液相色谱法测定其纯度，纯度都在98％以上，可以达到药用标准；采用SDS-PAGE电泳法也证明所得的蛋白溶液只有一条蛋白带，其分子质量约为14000；鸡胚背根神经节体外培养法证明，纯化所得蛋白溶液在浓度为9ng／mL时即可维持神经纤维的最大生长。对分离得到的NGF蛋白溶液进行小白鼠急性毒性试验和长期毒性实验证明，中华眼镜蛇蛇毒中纯化的NGF蛋白急性毒性和长期毒性在小白鼠体内为阴性。 采用两步色谱法分离纯化蛇毒神经生长因子所得的目标产品经分析，各项指标不低于传统方法所报道的水平，部分指标优于文献报道。