RNase A(EC 3.1.27.5)是一种核酸内切酶,分子量为13.7kD,来源于牛胰腺。该酶能在RNA分子内嘧啶碱基(U和C)处切开3’,5’-磷酸二酯键,形成具有2’,3’-环磷酸衍生物寡聚核苷酸。医药上,RNaseA在治疗外伤及关节疼痛,抑制流感及疱疹病毒,以及治疗急性胰腺炎、流行性脑炎上具有广泛的应用。我国每年都要消耗大量的RNase A产品,但由于国内的RNase A产品纯度不够,酶活性不及国外产品高,导致现在市场流通的仍以进口产品为主,国内生产企业与国外各大生物公司比,缺少竞争力。为了进一步优化国内RNase A产品生产工艺,建立RNase A纯度、酶活性及其它杂质等检测方法,建立RNase A产品国家标准,以提高国内产品的市场竞争力。本研究建立了两种RNaseA分离提纯的生产工艺,对生产过程的影响因素进行验证分析,提出解决办法。运用本工艺生产的RNase A,在纯度上,用SDS-PAGE电泳检测目标条带≥95%,酶活力平均值58.69 kU/mg,相对于国内产品电泳杂带多,酶活力不到100U的现状,本实验的建立生产工艺有望大大提高国内RNaseA的生产水平。继而,本研究在国际标准基础上,对RNase A酶活力定义及检测方法进行验证优化,建立了一套新的酶活力定义及检测方法,以满足我国RNase A规模化生产所需质量检测的需求。同时建立RNase A定性、纯度、杂质检测方法,以适用我国RNase A产品规模化生产的日常质量检测需求。本研究在规范国内生产,促进我国RNase A产业化的形成,以及提高我国RNase A产品在国际市场的竞争力上具有重要意义。