制何首乌为蓼科植物何首乌Polygonum multilflorum Thunb.的干燥块根的炮制加工品。制何首乌药理作用的物质基础主要是磷脂、蒽醌、二苯乙烯苷类等成分。酸枣仁为鼠李科植物酸枣 Ziziphusujube Mill.var.spinosa(Bunge)Hu ex H.F.Chou 的干燥成熟种子,其主要有效成分为酸枣仁总皂苷、酸枣仁总黄酮、酸枣仁油。目前酸枣仁和制何首乌对照药材在研制与标准使用中存在以下问题:酸枣仁为种子类药材,含油脂类成分较多,易酸败,经粉碎后,稳定性更差,不利于贮存。而且样品处理麻烦,使用时需脱脂,降低了检验的效率;制何首乌饮片为何首乌的炮制品,两者的性味归经、功能主治是不同的,饮片在炮制加工过程中理化性质发生了一系列变化,但是现行质量标准中制何首乌的薄层鉴别照搬何首乌药材的薄层方法和控制指标,这显然是不合理的,不能体现中药的炮制特点及临床应用。故如何保证酸枣仁的标准物质的质量稳定,如何研发能反应制何首乌饮片的内在特征的对照物质是我们需要解决的课题。本课题是《中国药典》2015年版科研项目“药材和饮片薄层色谱鉴别用对照提取物的研究与制备”的一部分。本实验以制何首乌和酸枣仁为研究对象,按照中药标准物质研制原则和技术要求,结合酸枣仁和制何首乌自身化学成分的特点及在现行质量标准中的使用情况,利用现代的提取制备技术,制备成质量稳定、均匀性好,且易于生产、流通、贮存和使用的对照药材提取物,供中药标准中薄层鉴别使用。目的:研究与制备酸枣仁和制何首乌薄层色谱鉴别用对照提取物,并建立对照提取物的质量标准草案。用对照提取物代替化学对照品或对照药材,修订相应的质量标准。研究酸枣仁药材与制何首乌饮片对照提取物,并将其应用于中药质量控制中,提高和完善中药的质量控制和保证临床用药安全。方法:综述和总结制何首乌与酸枣仁的化学成分信息及标准使用情况,为实验设计作基础;分别收集四批次基原清楚的制何首乌饮片与酸枣仁药材样品,按照《中国药典》2010年版对其质量检测,选择一批最具代表性的药材作为对照提取物研究与制备的对照药材原料;通过小试实验优选对照提取物的提取与制备工艺,明确提取的条件(包括溶剂种类、溶剂浓度、溶剂用量倍数、提取次数等)、辅料种类与用量、干燥时间、对照提取物得率等工艺参数;考察对照提取物的性状特征、薄层色谱行为、含水量、有效成分含量,以保证对照提取物的质量。采用了 5种薄层色谱展开溶剂系统,4种检视方法,鉴别了大黄素、大黄素甲醚,2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷,进行了制何首乌对照提取物与对照药材的等量同质性研究。采用了 3种薄层色谱展开溶剂系统,4种检视方法,鉴别了酸枣仁皂苷A和B、斯皮诺素,研究了酸枣仁对照提取物与对照药材等量同质性。以保证对照提取提取物与对照药材的量与质的一致性;按照小试确定的工艺批量制备对照提取物,每个月考察其质量。通过稳定性、均匀性、溶解性试验,明确影响稳定性的因素,各部位有效成分含量是否均匀,溶解对照提取物的溶剂种类。建立制何首乌和酸枣仁薄层色谱鉴别用对照提取物的质量标准草案,主要内容包括名称、来源、制法、性状、鉴别、规格、包装、贮存。研究用制何首乌薄层色谱鉴别用对照提取物代替何首乌对照药材鉴别养血生发胶囊处方中制何首乌的TLC方法。实验考察了酸枣仁薄层色谱鉴别用对照提取物取代酸枣仁皂苷A和B作为对照物质用于枣仁安神胶囊与枣仁安神颗粒的可行性方案。结果:样品酸枣仁药材ZPS-3与制何首乌饮片PMRP-3质量中等偏上,选作为对照提取物研究与制备的目标样品。确定的制何首乌对照提取物提取和制备工艺为:取制何首乌,粉碎成粗粉,加95%乙醇加热回流提取2次,每次1小时,第一次加10倍量,第二次加8倍量,滤过,合并滤液,滤液减压浓缩至适量。加入糊精适量,混匀,制成颗粒,干燥,即得。每克提取物相当于原药材2.7克。确定的酸枣仁对照提取物提取和制备工艺为:取酸枣仁,粉碎成粗粉,加95%乙醇加热回流提取2次,每次1小时,第一次加10倍量,第二次加8倍量,滤过,合并滤液,滤液减压浓缩至适量。加入糊精适量,混匀,制成颗粒,干燥,即得。每克提取物相当于原药材1.3克。实验结果表明该工艺具有可行性,对照提取物质量优越、理化性质稳定、均匀性好,与对照药材等量同质。制订了制何首乌薄层色谱鉴别用对照提取物的质量标准草案,用其代替了何首乌对照药材鉴别养血生发胶囊处方中制何首乌,并修订了养血生发胶囊的质量标准。制订了酸枣仁薄层色谱鉴别用对照提取物的质量标准草案,用其代替了酸枣仁皂苷A和B鉴别了枣仁安神胶囊与枣仁安神颗粒中的酸枣仁,并修订了枣仁安神胶囊和枣仁安神颗粒的质量标准。结论:本课题研究与制备的制何首乌和酸枣仁薄层色谱鉴别用对照提取物可作为标准物质使用。化学对照品酸枣仁皂苷A、B和斯皮诺素价格昂贵,如用对照提取物,检验成本就会大幅降低。制何首乌饮片与何首乌的薄层不完全一致,因此处方中有制何首乌的中成药应该用制何首乌对照提取物更有针对性。