小麦品种抗旱性评价和脯氨酸合成关键基因TaP5CS序列分析

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干旱是世界上最严重的自然灾害之一,对小麦的生长发育造成了严重的影响。鉴定和筛选抗旱小麦品种,确定渗透调节物质与抗旱性之间的关系,挖掘与抗旱相关的基因可为抗旱小麦品种的选育和推广提供依据。本研究对148和155份小麦品种分别进行萌发期和全生育期的抗旱性鉴定和评价;以两组极端抗旱性品种为材料,测定和比较分析幼苗叶片响应干旱胁迫的脯氨酸积累量变化差异;用电子克隆、同源克隆技术和生物信息学软件分析等方法,获得了晋麦47脯氨酸合成关键酶基因TaP5CS的3个部分同源基因,并与数据库已有序列进行了比对分析。主要结果如下:1.小麦品种抗旱性评价:148份小麦品种萌发期抗旱性鉴定结果表明,正常供水条件下平均发芽率为98.3%,最小值为71.8%,最大值为100.0%;﹣0.5 MPa PEG-6000胁迫下平均发芽率为48.5%,最小值为16.3%,最大值为81.7%;相对发芽率的平均值为49.1%,最小值为16.37%,最大值为81.7%,表明干旱胁迫能够明显降低小麦种子的发芽率。依据相对发芽率,可将148份小麦品种划分为4种抗旱性等级,其中鉴定出强抗旱性的品种(R型)11个,占7.4%;中等抗旱性的品种(MR型)59个,占39.9%;弱抗旱性的品种(S型)71个,占48.0%;极弱抗旱性的小麦品种(HS型)7个,占4.7%。155份小麦品种全生育期抗旱性鉴定结果表明,抗旱指数的平均值为0.90,最小值为1.61,最大值为0.42。旱地型小麦品种的萌发期相对发芽率与全生育期抗旱指数的相关系数为0.948,达到极显著正相关(P<0.01),水地型小麦品种的萌发期相对发芽率与全生育期抗旱指数也达到极显著正相关(P<0.01),表明全生育期抗旱性与萌发期抗旱性呈显著正相关。2.干旱胁迫下不同抗旱性品种幼苗叶片的脯氨酸含量积累动态变化特性:利用﹣0.5 MPa PEG-6000溶液模拟干旱胁迫处理两组抗旱性差异显著品种的幼苗,测定不同时间点叶片脯氨酸的含量。结果表明,在测定的0~120 h内,随干旱胁迫时间的延长叶片脯氨酸含量整体呈增加趋势,到120 h达到最大;与极弱抗旱性小麦品种相比,强抗旱性小麦品种积累的脯氨酸更多,且达到极显著水平(P<0.01)。在干旱胁迫120 h时,10份小麦品种的叶片脯氨酸含量与萌发期相对发芽率之间的相关系数为0.998,达到极显著正相关(P<0.01),表明小麦叶片响应干旱表达积累的脯氨酸含量与萌发期抗旱性密切相关。3.TaP5CS基因的克隆及序列差异:在品种晋麦47中,克隆了TaP5CS的A基因组部分片段序列3870 bp,B基因组全长序列7336 bp,D基因组全长序列7525 bp。与中国春的已知序列进行比对发现,晋麦47的TaP5CS在A基因组(TaP5CS-A1)仅获得了部分序列,存在3个单碱基突变位点;B(TaP5CS-B1)和D(TaP5CS-D1)基因组晋麦47的全长序列与中国春完全一致,一致性为100%。
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