【摘 要】
：
狂犬病作为一种古老的人兽共患病,是由狂犬病病毒（RABV）侵入中枢神经系统引起的传染性急性脑脊髓炎。通常由患病动物通过唾液以咬伤的方式传染给人或动物,因发病后常表现恐水现象,因此又被称为恐水症。RABV是弹状病毒科狂犬病毒属的一员,被认为是目前已知的最致命的病原体之一,病死率近乎100%。其基因组为不分节段的单股负链RNA,可编码核蛋白（N）、磷蛋白（P）、基质蛋白（M）、糖蛋白（G）以及依赖RN
【基金项目】
：
国家重点研发计划:重要神经嗜性人兽共患病免疫与致病机制研究—病原感染与传播机制研究（2016YFD0500402）； 国家自然科学基金,狂犬病病毒街毒株的生物学特性及其在犬唾液分泌机制研究（31972712）； 国家自然科学基金,RABV感染抑制Rac1活性和神经突触功能的机制（31702238）；
论文部分内容阅读
狂犬病作为一种古老的人兽共患病,是由狂犬病病毒（RABV）侵入中枢神经系统引起的传染性急性脑脊髓炎。通常由患病动物通过唾液以咬伤的方式传染给人或动物,因发病后常表现恐水现象,因此又被称为恐水症。RABV是弹状病毒科狂犬病毒属的一员,被认为是目前已知的最致命的病原体之一,病死率近乎100%。其基因组为不分节段的单股负链RNA,可编码核蛋白（N）、磷蛋白（P）、基质蛋白（M）、糖蛋白（G）以及依赖RNA的RNA聚合酶蛋白（L）五种结构蛋白。病毒基因组RNA与N、P、L蛋白共同构成核糖核蛋白复合体（RNP）,协助病毒基因组的复制和转录;M蛋白位于RABV囊膜下,连接RNP和保护性抗原G;G蛋白与宿主细胞表面受体结合,参与RABV入胞及神经元间的传播。尽管人们对RABV复制装配的认识取得了很大进步,特别是对内基氏小体中复制的阐明。研究不同RABV毒株各个重要结构蛋白在神经细胞和体细胞内的合成场所,将为子代病毒粒子的装配提供重要数据。本研究首先利用TCID50对RABV三种毒株,即标准攻击毒株CVS-11、口服疫苗株SRV-9、街毒株PB4在小鼠神经母细胞瘤细胞（N2a）、乳仓鼠肾细胞（BHK）两种细胞上的效价进行了测定,以研究RABV不同毒株在神经细胞和体细胞上的效价差异。随后分别在N2a和BHK细胞中以相同的MOI病毒量接种CVS-11、SRV-9、PB4进行免疫荧光,观察不同RABV毒株N、P、M、G蛋白与内质网（ER）、高尔基体（Golgi）在N2a和BHK细胞中的共定位,以及M蛋白和G蛋白与ER、Golgi三者的共定位,M蛋白和N蛋白与ER、Golgi三者的共定位等,并应用小鼠脑组织冰冻切片免疫荧光进行验证,以探究不同RABV毒株各结构蛋白在神经细胞和体细胞内的合成场所,进而推断子代病毒粒子结构蛋白的装配过程。结果显示,RABV标准攻击毒株CVS-11、口服疫苗株SRV-9、街毒株PB4效价在同一种细胞系中存在明显差异,CVS-11效价相对较高,SRV-9效价相对较低,而PB4只感染N2a细胞,效价很低。随后免疫荧光研究发现,在N2a和BHK细胞中,CVS-11、SRV-9、PB4的M蛋白呈弥散性分布,与ER和Golgi都存在明显的共定位,并且在细胞膜附近M蛋白也有表达。三种RABV毒株G蛋白的表达分布与M蛋白相似,G蛋白与ER和Golgi在胞浆内也存在共定位,部分G蛋白也沿细胞膜呈弥散性分布。不同RABV毒株N蛋白,在N2a细胞和BHK细胞中,大多以球形散在分布,且与ER和Golgi不存在共定位;P蛋白也多以球形出现在两种细胞内,与ER和Golgi也均不存在共定位。进一步比较发现,在N2a和BHK细胞中,CVS-11、SRV-9的M蛋白与G蛋白共定位除出现在ER、Golgi外,还大多出现在细胞膜附近,说明M蛋白与G蛋白通过ER-Golgi途径合成后,结合在一起然后被共同转运至细胞膜附近以参与子代病毒出芽。此外,在N2a和BHK细胞中,CVS-11、SRV-9的M蛋白与N蛋白的共定位大多出现在靠近细胞膜附近,预示此时病毒处于出芽阶段。但无论是N2a细胞,还是BHK细胞,ER和Golgi这两种细胞器都没有参与N蛋白和P蛋白的合成加工过程。小鼠脑组织冰冻切片免疫荧光也显示CVS-11 M蛋白与ER和Golgi存在共定位。从上述结果可知,不同RABV毒株各个结构蛋白在体外神经细胞内的合成场所和体细胞内的基本相同,且在体内脑组织中也有相似过程。本研究选择了RABV标准攻击毒株、口服疫苗株及街毒株,比较了其各个结构蛋白在不同细胞系内的合成场所,根据合成部位及在膜附近的共定位等信息,初步推断了子代病毒粒子的装配过程,为研究RABV致病机制丰富了数据。
其他文献
为了进一步贯彻落实新课程改革教育理念，在中职学校开展体育教学活动的过程中凸显素质教育的导向作用，笔者通过关注个体差异与个性需求合理安排教学内容，注重感官体验和空间延展，高效应用信息技术，注重师生关系和生生关系弹性优化教学形式，在实际教学过程中走出一条“素质教育+体育教育”的创新之路，提高了体育教学水平。
《祝福》是小说集《彷徨》的首篇作品,创作于1927年,真实而深刻还原了这一时期中国农村地区的社会面貌,辛亥革命虽然成功推翻了封建帝制,但是在广大的农村地区,封建社会的基础并未被完全摧毁,底层人民仍然受到封建礼教以及宗法观念之束缚。这一时期的鲁迅从辛亥革命成功的狂喜中转入对革命的失望以及怀疑,从他将小说集命名为《彷徨》就可以看出鲁迅当时的内心世界。在《祝福》中,"祥林嫂""我"以及"鲁镇"所构
强激光场作用下原子和分子的双电离在强场物理研究中具有重要的意义,揭示了双电离过程中电子关联效应,为人们研究自然界中的电子关联提供了有效手段,其中双电离机制可以由次序双电离（SDI）和非次序双电离（NSDI）进行区分。金属原子具有外壳层活跃电子,其双电离过程在学术领域中仍然存在很多空白。目前已有对Mg原子的NSDI研究,包括电子关联动力学,以及NSDI对激光波长和激光偏振的依赖等。研究表明金属原子M
成像质量和成像效率一直是科研人员不断奋斗的目标。随着成像技术的发展,鬼成像由于其独特的优势逐渐进入大众视野,鬼成像又叫关联成像,是一种新的光学成像技术,鬼成像可以在大气湍流和极弱光的条件下实现高分辨率成像,并且抗干扰能力强,成本低。众所周知,传统的胶卷相机和现代的数码相机其采样和成像都是在同一个区域内完成的,而鬼成像将采样和重建图像两个过程分开,最终实现了“隔物成像”。本文利用二维Walsh变换完
目的 建立H1N1流感病毒感染树鼩模型，探讨流感病毒动力学变化和在呼吸系统组织中的分布特征。方法 选择3～3.5周岁成年树鼩（Tupaia Belangeri Chinensis）24只，雌雄各半，随机分为空白组（B组）和模型组（M组）各12只，使用H1N1流感病毒每只600μL(1×106.8TCID50/0.1mL)经鼻腔感染M组树鼩，在-3～10d期间每天早晨测量肛温，同时采集咽拭子、鼻拭子
强飞秒激光脉冲在空气中传输引起的非线性效应比如成丝现象一直备受关注。自聚焦现象是由空气的光克尔效应产生的,而散焦效应是由电离后产生的等离子体所带来的。自聚焦现象和散焦效应共同作用,从而实现了一种动态的平衡。会形成长而明亮的低密度等离子体通道,这就是“丝”。等离子体经历复杂的跃迁过程会辐射特征荧光光谱。通过测量飞秒激光成丝过程中的荧光光谱,可以了解激光强度、电子温度、等离子体密度及其它信息,也有助于
野上弥生子是经历明治、大正、昭和三个时代的女性作家,拥有近百年的人生阅历,曾是世界文坛最高龄的执笔作家。篠田一士、大冈升平、小田切进等都曾评价野上弥生子为夏目漱石最忠实的继承者,其中甚至有称赞其才能在夏目漱石之上者。野上弥生子是否超越夏目漱石此点不在本论文论述范围之内,但这些赞誉无疑是对野上弥生子可与夏目漱石比肩的文学才能的肯定。野上弥生子所作《海神丸》不仅是其漫长文学生涯中的转折大作,亦是大正文
目的 通过改良胸腰椎椎体穿刺点及穿刺角度，探讨改良单侧经皮椎体后凸成形术治疗骨质疏松性胸腰椎压缩性骨折的临床疗效及其优势。方法 选取2019年6月至2020年6月在我院治疗的因骨质疏松所致胸腰椎压缩性骨折患者32例，共38椎体，应用改良经皮椎体后凸成形术治疗，采用VAS评分评价患者术前、术后24 h及术后1年疼痛缓解情况；通过测量脊柱侧位X线片上术椎前缘、中部、Cobb角以及正位X线片上椎体术侧和
旋毛虫（Trichinella spiralis,T.spiralis）是一种人兽共患食源性寄生虫,生食或半生食含有旋毛虫的猪肉及其产品是人类感染旋毛虫的主要方式,因感染旋毛虫而引起的疾病被称为旋毛虫病（Trichinellosis）,该病呈世界性分布且严重威胁人类健康和公共安全,因此,猪旋毛虫检测被列为屠宰必检项目。目前使用的旋毛虫检测方法存在技术短板,无法满足对日常养殖和现代化屠宰加工过程中,
白色念珠菌（Candida albicans）作为念珠菌属中最常见的一种条件致病菌,感染率和死亡率逐年升高。在机体正常时其主要寄生在人体或畜禽的粘膜上,由于抗生素的大量使用、化疗和放疗以及医学技术的日益发达,使得白色念珠菌的正常菌群遭到破坏,进而失调,引起各种形式的念珠菌病,从慢性浅表真菌感染到严重的播散性感染。白色念珠菌感染同时发生在畜禽和小动物身上,由于畜禽舍的不卫生、不通风,使得畜禽的粪便中