论文部分内容阅读
罗非鱼(Tilapia),俗称非洲鲫鱼,隶属于鲈形目、鲈形亚目、丽鱼科(Cichlidae)、罗非鱼属。罗非鱼是广盐性鱼类,海淡水中皆可生存,食性广泛,生长迅速。由于其肉质鲜美,易于养殖,已经成为世界性主要养殖鱼类,目前我国南方沿海城市已广泛养殖。本文开展了罗非鱼鱼苗甲基睾丸酮残留研究试验,罗非鱼甲基睾丸酮药物代谢动力学特征和消除规律及其代谢产物的药代动力学特征三个不同方面进行了研究,为罗非鱼养殖业健康和水产品质量安全提供监督检验的技术支撑和理论支持。以20mg/kg和2mg/kg剂量对经检测不含甲基睾丸酮残留的罗非鱼口灌给药,用高效液相色谱法测定血清及组织中甲基睾丸酮(MET)的浓度。用乙酸乙酯提取样品,florisil小柱净化。以3p97软件分析药时数据,MET在两个浓度组均符合一级吸收二室开放模型,吸收半衰期分别为0.29h、0.28h;分布半衰期分别为0.65h、0.57 h,达峰时间分别为是0.78h、0.60 h,消除半衰期分别为18.40h、5.98h。20mg/kg组血清和肌肉中MET残留至144h仍有检出,至216h血清和肌肉样品MET均未检出;肝脏中的药物浓度高于血清和肌肉中的浓度,MET残留至24h有检出,第48h的样品未检出。结果表明:口灌给药,MET在罗非鱼体内吸收、分布快,肝脏为主要吸收和代谢器官,与血清和肌肉相比消除速率要快,血清和肌肉中的MET消除速率相对较缓慢,因此开展MET监督检验除了常规的肌肉样品的检测外,还应增加血液样品的检测。本文利用气相色谱串联质谱法研究了甲基睾丸酮代谢产物17α-甲基- 5β-雄甾-3α,17β-二醇(MeAD)在罗非鱼体内的药代动力学特征。以20mg/kg剂量对罗非鱼口灌甲基睾丸酮(MET)后,取血清样品。加入PH值为5.2的乙酸缓冲盐后,用β葡糖酸酐酶55℃水解3h,乙酸乙酯提取,Water HLB小柱净化,用MSTFA进行衍生化反应,GC-MS法测定血药浓度。3P97药代软件对数据进行处理,结果是MeAD在罗非鱼体内药时曲线符合一级吸收二室开放模型,主要药动学参数为:T1/2(ka)为0.586h ;T1/2(alpha)为4.164h ;T1/2(beta)为362.740h; C(max)为5604.883ng/ml;T(peak)为1.920h。表明,MeAD在罗非鱼体内消除速率非常缓慢,残留量较高,因此,除了加强MET的监督检验外,还应加大对MET代谢物的检测,及早建立其代谢物的检测方法标准。同时还开展了罗非鱼鱼苗甲基睾丸酮残留研究试验,利用添加不同浓度甲基睾丸酮(MET)饲料投喂刚孵化的罗非鱼鱼苗,投喂不同浓度MET饲料30d后,HPLC检测其体内残留量。继续投喂正常未添加MET药物的饲料,30d后再次检测MET残留量。研究结果表明,投喂30d后的罗非鱼苗种,对照组未检出MET残留,其余5个添加MET实验组的MET残留量随着添加浓度的增加而增加;继续投喂未添加MET的正常饲料30d后,所有实验组均未检出MET残留。