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冷应激是北方地区养殖场中常易出现的问题,尤其是在早春育雏产仔过程中对新生动物危害更为严重。贵妃鸡是一种珍贵家禽,具有良好的养殖前景,但是有关冷应激对其生理生化及免疫功能指标的影响还未见详细报道。本文以健康贵妃雏鸡为研究对象,研究在比正常饲养温度低10℃冷应激状态下贵妃雏鸡生长、血液参数及血清生化指标等生理生化动态变化,白细胞分类、免疫器官中肥大细胞数量和IL-2mRNA表达等免疫指标动态变化以及应激蛋白HSP70mRNA表达的动态变化,同时观察益生菌、p-葡聚糖处理对上述指标的影响,探讨具有免疫调节作用的新型饲料添加剂益生菌和葡聚糖是否有抗冷应激作用,为提高珍禽抗冷应激能力措施的提出奠定理论基础。通过试验我们获得如下结果:(1)益生菌和葡聚糖处理明显影响冷应激状态下贵妃雏鸡生理生化变化。益生菌处理2h后哈氏腺指数明显升高。急性冷应激能引起雏鸡血红蛋白、红细胞和白细胞总数等血液学参数的明显波动,益生菌处理有明显双相调节作用,使之趋于平衡。冷应激后血清γ-谷氨酸氨基转移酶(r-GT)、乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)活性出现明显波动变化,益生素和葡聚糖处理有明显回调作用。益生菌和葡聚糖处理后超氧化物歧化酶(SOD)活性增加,谷丙转氨酶(GPT)活性下降,说明益生菌能增加雏鸡抗氧化和保护肝脏的能力。(2)益生菌和葡聚糖处理明显影响冷应激状态下贵妃雏鸡白细胞分类、免疫器官中肥大细胞数目和IL-2mRNA表达等免疫功能指标。白细胞分类结果显示,在急性冷应激期间,雏鸡的白细胞分类计数波动变化明显,嗜碱性粒细胞数目和嗜中性粒细胞/淋巴细胞(H/L)比值都明显增加。冷适应后淋巴细胞数目明显增加,嗜中性粒细胞明显减少,H/L比值下降。益生菌明显增加白细胞数量,葡聚糖降低了嗜酸性粒细胞数目。免疫器官肥大细胞组织学染色计数结果显示,急性冷应激后哈氏腺内肥大细胞增多,益生菌和葡聚糖处理可双相调节肥大细胞数量;冷应激后胸腺内肥大细胞数目减少,益生菌处理可回调其数目;益生菌和葡聚糖处理可上调法氏囊和脾脏肥大细胞数量。RT-PCR结果显示脾内IL-2mRNA表达水平在应激24h内先降后升,益生菌短期处理对其影响不明显;而葡聚糖处理15d后,其表达水平明显升高,表明葡聚糖对雏鸡脾脏有免疫调节功能。胸腺内IL-2mRNA表达水平在应激12-24h后明显升高,在慢性应激到冷适应阶段表达水平明显下降。益生菌和葡聚糖处理有上调作用。法氏囊内IL-2mRNA表达变化与胸腺内情况类似。这些结果提示冷应激对雏鸡细胞免疫功能有明显影响,而益生菌、葡聚糖能提高雏鸡适应冷应激的能力,改善应激状态下的细胞免疫功能。(3)益生菌和葡聚糖处理明显影响冷应激状态下贵妃雏鸡脾脏、胸腺及法氏囊组织中HSP70mRNA表达。RT-PCR结果显示雏鸡受到冷应激4h后,法氏囊内HSP70mRNA表达水平大幅升高,而胸腺内其表达水平在冷应激4h内明显下降,应激3d后有大幅上升。而脾内HSP70mRNA表达变化不明显。说明冷应激对不同器官内HSP70mRNA表达影响不一样。益生菌处理明显降低雏鸡脾脏和法氏囊内HSP70mRNA表达水平,这些结果表明益生菌处理对贵妃雏鸡有抗应激作用。葡聚糖处理后雏鸡法氏囊HSP70mRNA表达水平大幅升高,可见葡聚糖对HSP70mRNA的调节也存在着器官差异。