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目的:(1)观察蒲金口服液对宫内感染/炎症致早产脑损伤大鼠神经行为学和脑组织勿动蛋白-A(nogo for neuron,Nogo-A)、少突胶质细胞髓鞘糖蛋白(oligodendrocyte myelin glycoprotein,OMgp)m RNA表达的影响。(2)比较蒲金口服液高、低剂量、银杏叶提取物和早期干预、晚期干预对早产脑损伤大鼠髓鞘再生与修复的作用。(3)探讨“痰”和“瘀”是宫内感染/炎症造成早产儿脑损伤的主要病理基础,为早期应用活血化瘀、化痰开窍中药干预治疗提供实验依据。方法:(1)动物模型制作:将30只孕鼠随机分为脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)组(n=24只)和对照组(n=6只),分别在孕第16、17天连续2天腹腔注射LPS 350ug/kg和同等剂量生理盐水,胎龄<22天分娩的仔鼠为早产鼠。(2)实验动物分组:将LPS组早产仔鼠80只随机分为8组,每组10只。分别为:早期药物干预组A1、B1、C1、D1,晚期干预组A2、B2、C2、D2,其中A1、A2为蒲金口服液低剂量组,B1、B2为蒲金口服液高剂量组,C1、C2为银杏叶提取物组,D1、D2为模型组。(3)干预方法:早期药物干预组生后0日龄灌胃给药,晚期药物干预组生后7日龄灌胃给药,均连用7d。干预后同条件饲养至21日龄。(4)观测指标:母鼠孕产情况。取子宫及胎盘组织行HE染色观察宫内感染/炎症情况。两组仔鼠的出生体重、颜色、反应能力、活动情况。HE染色观察两组0日龄仔鼠脑组织病理学改变,RT-PCR技术检测Nogo-A、OMgp m RNA的表达。21日龄神经行为学评分并采用RT-PCR技术检测8组大鼠脑组织Nogo-A、OMg-p m RNA的表达。结果:(1)一般情况:LPS组孕鼠造模后容易发生流产和早产,且有难产死亡现象。与对照组孕鼠相比,LPS组孕鼠产仔数少(P<0.05)。与对照组相比,LPS组早产仔鼠体重低(P<0.05)、活动少、皮肤颜色紫绀、应激反应弱。(2)HE染色病理形态学改变:LPS组孕鼠子宫及胎盘组织病理检测见血管充血以及中性粒细胞浸润,对照组子宫及胎盘组织病理检测未见炎性反应;LPS组早产仔鼠病理检测见脑白质、内囊和胼胝体结构稀疏,神经纤维排列不齐,神经元数目较少,并可见侧脑室及脑白质内出血以及胶质细胞聚集。(3)神经行为学能力:与模型组相比,蒲金口服液高、低剂量和银杏叶提取物均可提高早产脑损伤大鼠神经行为学能力(P<0.05),且早期干预作用明显优于晚期干预(P<0.05)。但蒲金口服液高、低剂量与银杏叶提取物在提高早产脑损伤大鼠神经行为学能力方面三组间两两比较无明显差异(P>0.05)。(4)Nogo-A m RNA和OMgp m RNA相对表达量的结果:与对照组所产仔鼠(0日龄)相比,LPS组大鼠脑组织中Nogo-A m RNA和OMgp m RNA的相对表达量明显上调(P<0.05)。早期药物干预组中,与模型组相比,蒲金口服液高、低剂量与银杏叶提取物均能明显下调大鼠脑组织中Nogo-A、OMgp m RNA的相对表达量(P<0.05)。蒲金口服液高、低剂量和银杏叶提取物三组之间两两比较,蒲金口服液高剂量下调Nogo-A、OMgp m RNA相对表达量的作用明显优于蒲金口服液低剂量和银杏叶提取物,差异具有统计学意义(P<0.05)。与银杏叶提取物相比,蒲金口服液低剂量在下调Nogo-A、OMgp m RNA相对表达量的作用方面差异无统计学意义(P>0.05)。晚期药物干预组中,与模型组相比,蒲金口服液高、低剂量与银杏叶提取物均能明显下调仔鼠脑组织中Nogo-A m RNA和OMgp m RNA的相对表达量,差异有统计学意义(P<0.05)。与蒲金口服液低剂量和银杏叶提取物相比,蒲金口服液高剂量下调Nogo-A、OMgp m RNA相对表达量的作用更明显,差异有统计学意义(P<0.05),且银杏叶提取物在下调Nogo-A m RNA和OMgp m RNA相对表达量的作用方面较蒲金口服液低剂量明显,差异有统计学意义(P<0.05)。与晚期药物干预各组相比,蒲金口服液高、低剂量和银杏叶提取物的早期干预在下调Nogo-A、OMgp m RNA相对表达量的作用方面更明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:(1)宫内感染/炎症可导致早产脑损伤大鼠神经行为学改变,使脑组织中Nogo-A m RNA和OMgp m RNA的相对表达量上调。?蒲金口服液可下调宫内感染/炎症致早产脑损伤大鼠脑组织中Nogo-A m RNA和OMgp m RNA的相对表达量,且早期药物干预下调作用更明显。为早期应用活血化瘀和化痰开窍药物干预宫内感染致早产脑损伤提供实验依据。?研究证实宫内感染/炎症致早产儿脑损伤的中医病理机制主要是“痰”和“瘀”的理论。