为了解决烤烟生育前期土壤有机氮矿化率较低,不能满足烤烟对氮的吸收这一问题,从黔西植烟土壤中筛选出氮代谢优势微生物制成复合菌剂,分别在黔西、威宁两地探究了原位与异位施用效果,具体研究结果如下:1.在黔西林泉和威宁黑石选取当地常规施肥的六个时期植烟土壤,采用稀释平板法对植烟土壤中三大微生物类群进行研究。结果表明:两个区域的土壤主要微生物组成比较类似,都是细菌>放线菌>真菌,其中细菌数量占土壤微生物总量的68.14%-87.48%,真菌数量占土壤微生物总数的百分比最小为3.67%-12.12%,放线菌占土壤微生物总量的8.76%-26.19%。在烤烟生长的的各个时期,黔西的土壤细菌群落相对稳定,变化幅度相对较小,而威宁的土壤细菌变化范围相对较大。两个区域土壤放线菌在整个生育时期的变化都相对较大。黔西和威宁的土壤细菌数量在烤烟移栽后都开始增长,并且都在团棵期达到顶峰,随后开始减少,但是在现蕾期,威宁的土壤细菌又开始出现了增长趋势,而黔西土壤细菌则一直下降。大体来看,两地的土壤微生物数量都是在团棵期达到最大值。2.用氨化细菌、亚硝化细菌分离培养基从黔西植烟土壤中分离筛选优势细菌群,并用显色法及作用强度测定进行复筛,得到氮转化作用强度大的菌株7株。通过16s-DNA-PCR鉴定,确定了编号分别为1、2、3、4、5、6、7的7株菌株来配制复合微生物菌剂。采用滤纸片法对配制复合微生物菌液的各菌株间进行拮抗试验测试,7株菌株间并无相互拮抗作用,可以共同生长,互不影响,可以用于复合微生物菌剂的配制。3.在黔西和威宁采用田间试验研究了复合微生物菌剂在原位施用与异位施用效果,通过对各生育期植烟土壤的分析和成熟期土壤细菌高通量测序,结果表明在两地添加微生物菌剂有利于提高植烟土壤的微生物活性,提高脲酶含量和土壤氨化细菌及细菌数量,增加有机氮的矿化作用,改善细菌的群落结构,提高有益微生物(如鞘脂单胞菌属、链霉菌属、小单胞菌科、厌氧绳菌科等)和氮转化优势菌(如芽孢杆菌属、亚硝化单胞菌科、硝化螺旋菌属)的丰度。从而加速烤烟成熟期土壤中有机氮的分解,有利于提高旺长期土壤无机态氮的含量,从而使成熟期植烟土壤有机质及氮含量保持较低水平,并且施用微生物菌剂可在一定程度上提高亩产及亩产值,改善烟叶的化学品质,提高两糖比、钾氯比,改善氮碱比。该复合微生物菌剂在两地的应用效果又存在一定的差异。在土壤有机氮转化方面,黔西施入菌剂后土壤中的碱解氮、铵态氮及全氮含量在旺长期的增长幅度及现蕾期和团棵期的降低幅度都好于威宁;在土壤生物活性上细菌及氮转化细菌的数量及有益微生物的丰度的提高也都好于威宁,但是土壤脲酶含量的提升效果却不如威宁。该菌剂微生物菌剂施入后需要一定时间的恢复适应期,为了使有机质在旺长期分解加速,将菌剂在伸根期和团棵期施入均有效果,威宁以团棵期施入效果最好,黔西则以伸根期施入效果最好。两地复合菌剂添加量均以100亿/株较优。在黔西,由于微生物菌剂的原位施用可以使微生物菌剂更好的定殖,且对当地土壤微生物区系的稳定性影响较小,所以表现出了比威宁异位施用更好的应用效果。