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犬弓首蛔虫是犬科动物体内常见的一种寄生线虫;不仅可导致宿主发育受阻;严重感染时还可引起宿主死亡;而且其幼虫也可感染人;可引起严重的内脏和眼睛幼虫移行症以及明显的免疫病理反应。感染儿童时甚至可致失明;严重威胁儿童健康;被称为最被忽略的寄生虫病;在公共卫生学上具有重要意义。但迄今为止;治疗及预防犬弓首蛔虫病任然依靠药物;犬弓首蛔虫病疫苗研究进展缓慢。 本论文以犬弓首蛔虫感染期幼虫作为研究对象;选择在犬弓首蛔虫感染性幼虫特异表达的犬弓首蛔虫烯醇化酶基因作为研究的目的基因;对其进行了克隆、序列分析及免疫效果评价。 本研究第一部分首次对犬弓首蛔虫的烯醇化酶基因片段进行了 PCR 扩增、克隆、序列测定和分析;从犬弓首蛔虫的cDNA中扩增出enol-1基因;连接至pMD18-T载体;并筛选阳性克隆后;测序鉴定。将测序结果正确的核苷酸序列翻译成氨基酸序列;运用生物信息学软件分析 enol-1 蛋白的结构;预测其抗原表位及功能位点;并运用 Maximum likelihood（ML）法构建了系统发育树。结果显示;enol-1基因长1311 bp;可编码437个氨基酸。Enol-1蛋白中包含18个-螺旋区;7个β-折叠区;10个亲水区域和16个柔性区域;并预测含有9个线性B细胞抗原表位;enol-1蛋白可能具有潜在的免疫原性。 本研究的第二部分构建了enol-1基因的真核表达质粒pVAX-Enol;用PBS稀释到l00 mg/100 μL;肌肉注射免疫Balb/c小鼠;并设立对照组（pVAX I、PBS和Control）。初次免疫后分别于第2周和第4周加强免疫一次;测定相应的体液免疫和细胞免疫指标;并于三免后第7天用犬弓首蛔虫感染性幼虫攻击感染Balb/c小鼠;4天后剖杀小鼠;取其肝脏和肺脏;用贝尔曼分离法收集幼虫;并比较各组回收虫体数目。 研究结果显示;pVAX-Enol DNA疫苗免疫Balb/c小鼠未能有效地诱导产生体液免疫和细胞免疫反应。实验组回收虫体与空白对照组、PBS对照组和空质粒对照pVAX1组相比差异均不显著（P<0.05）。提示pVAX-Enol DNA疫苗对小鼠并无明显的免疫保护作用。 本研究首次对犬弓首蛔虫enol-1基因进行了克隆及序列分析;并通过构建核酸苗评价了enol-1基因的分子疫苗潜力;研究结果基本阐明了犬弓首蛔虫enol-1基因序列、结构;为进一步研究犬弓首蛔虫enol-1基因的功能奠定了基础。