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β-conglycinin是引起仔猪肠道致敏的重要抗原蛋白;消化道中大豆抗原表位又是引起动物过敏的根本物质基础;也是造成动物对大豆蛋白过敏的原因之一。消化道是抗原蛋白最初进入体内与之接触的组织;如果小肠上皮细胞中存在大豆抗原蛋白的受体其小肠上皮存在的大豆抗原蛋白受体也与仔猪致敏密切相关;但是相关受体的研究甚少。为进一步探究其受体;首先要找到并明确大豆抗原β-conglycinin与仔猪肠上皮结合的蛋白。因此本研究通过比较不同种属动物的大豆过敏血清与大豆抗原蛋白 β-conglycinin 的抗原表位结合能力的差异;筛选出对仔猪过敏血清结合能力较强的抗原表位。然后采用免疫组化法;免疫共沉淀技术对大豆蛋白β-conglycinin及其抗原表位与仔猪肠上皮结合的蛋白进行鉴定。本研究为进一步揭示大豆抗原过敏机理及优化动物饲料技术服务。 试验Ⅰ：β-conglycinin抗原表位与仔猪、犊牛、大鼠致敏血清结合能力的比较 本试验采用ELISA和点杂交两种方法比较β-conglycininα亚基与β亚基与三种不同种属动物致敏血清结合能力的差异。结果表明大豆抗原蛋白β-conglycinin与三种动物过敏血清发生特异性结合的的线性抗原表位敏感区域存在着显著差异;且β-conglycinin致敏仔猪过敏血清与七段表位肽结合能力显著高于β-conglycinin致敏大鼠、犊牛的过敏血清。在七个表位肽段中;α2、β2、β3 三个表位与仔猪致敏血清的结合能力最强。本试验结论为试验Ⅱ鉴定仔猪肠上皮与β-conglycinin抗原表位结合蛋白提供试验基础。 试验Ⅱ：β-conglycinin及其抗原表位与仔猪肠上皮结合蛋白的鉴定 运用免疫组化法;免疫共沉淀及质谱分析技术从结合蛋白的部位以及其结合蛋白的种类与功能两个方面对大豆抗原蛋白及其主要抗原表位（依据试验Ⅰ结论来选择）与仔猪肠上皮结合蛋白进行鉴定。组化结果显示仔猪小肠上皮存在能与大豆抗原β-conglycinin及其表位结合的蛋白。进一步试验发现β-conglycinin及其抗原表位与仔猪肠上皮结合蛋白可分为骨架蛋白、催化酶蛋白、功能调节蛋白三类;且不同抗原表位与仔猪肠上皮结合蛋白种类存在差异;其中骨架蛋白均多于其他两种蛋白;且评分较高。研究结果为揭示仔猪致敏原因提供重要依据;为进一步分析肠上皮细胞中大豆抗原受体奠定了基础。