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猪圆环病毒相关性疾病（PCVAD）是指断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）、猪皮炎肾病综合征（PNDS）、猪呼吸系统混合疾病及繁殖障碍的总称。研究证明,猪圆环病毒2型（PCV2）是引起PCVAD的主要病原体。猪对PCV2具有较强易感性,而且传播途径多样。本病无特效的治疗方法,对猪进行疫苗接种是预防猪圆环病毒2型感染的有效手段。目前养殖场使用较多的疫苗包括亚单位疫苗、嵌合病毒灭活疫苗及全病毒灭活疫苗。PCV2全病毒灭活疫苗需要突破的工艺难点是圆环病毒的培养。传统的转瓶培养工艺,由于受细胞增殖面积、营养供应及气体交换等条件的限制,病毒增殖数量较少,导致下游工艺需要进行病毒浓缩才能达到配苗标准,然而浓缩工艺会造成杂蛋白富集,增加免疫应激的比例,不能有效满足养殖场对该疫苗的需求。在PCV2全病毒灭活疫苗研究中引入微载体悬浮培养技术,可以提高单位体积内的细胞量和产毒量,从有效性、稳定性和安全性等多方面对疫苗质量进行提升。本研究应用生物反应器对PCV2的微载体悬浮培养进行了系统研究。对PCV2增殖的猪肾细胞（PK-15A）的悬浮培养工艺进行了研究,优化微载体使用浓度、细胞接种量、细胞初始搅拌方式、生长阶段搅拌速度和培养基补给方式等关键技术参数。优化反应器内的细胞消化参数,摸索并建立该细胞在反应器内的消化工艺。优化病毒接种剂量（MOI）、维持液血清浓度、溶氧参数及培养温度参数。细胞培养工艺:确定载体浓度为3g/L,细胞接种量为10cells/micro-carrier,初始接种搅拌参数为加入细胞后补充培养基至1/3培养体积、初始转速为20r/min、培养2h后补足培养体积,搅拌速度设为30r/min,培养基补给方式为培养2日换一半营养液,细胞长势良好,培养细胞峰值达到1.5×106-2×106cells/mL。消化工艺:PBS清洗2次,每次1L清洗液,微载体上消化脱落的细胞超过85%,达到预期效果。病毒培养工艺:0.1MOI、2%血清浓度的维持液、40%溶氧量、37℃,连续培养收获至F9维持液,自F2起,各代次维持液的病毒滴度均不低于105.5TCID50/mL,最高可达到107.5TCID50/mL。PK-15A细胞在生物反应器上微载体悬浮培养效果良好,达到了国内外同类技术实现的较高细胞培养密度。实现PK-15A细胞在瑞士比欧反应器中逐级放大（16L-85L-500L）。实现PCV2悬浮培养规模化（500L）连续收获工艺,提高了病毒培养效价,节约了生产成本。