乙醛脱氢酶(Aldehyde dehydrogenase, ALDH)是一类可以将生物体内的醇类物质转化成相应的酸类物质的酶,广泛的存在于动物,植物,微生物中。在人体内,乙醛脱氢酶是人体乙醇代谢的关键酶,通过乙醇脱氢酶代谢成乙醛,再由乙醛脱氢酶代谢成乙酸,进而转化成水和二氧化碳,或者合成体内其他营养物质。在植物体内,乙醛脱氢酶主要是在植物处在胁迫环境中,诱导表达的一类酶,帮助植物自身战胜环境压力,达到得以生存的目的。在微生物体中,乙醛脱氢酶的作用也主要是应对于环境的压力,寻求生存的空间。酵母中乙醛脱氢酶的种类也较多,目前已发现有六种乙醛脱氢酶,ALD1-ALD6.他们在酵母体内的分布也不同,表达方式也有差异。其中ALD4和ALD5分布在酵母的线粒体中,主要表达线粒体内的乙醛脱氢酶,代谢由胞质内运送至线粒体内的乙醛。ALD1、ALD2、ALD3、ALD6主要分布在酵母的细胞质内,完成相应的功能。本实验主要分为两部分：1.实验首先将目的基因ALD4从酿酒酵母AS2.399中克隆出来,通过TA克隆和电转化,转化到毕赤酵母GS115中,构建得到基因工程菌P.pasoris GS115(Ppic9K-ALD4).2.设计正交试验,获得可以高密度发酵酿酒酵母AS2.399的培养基,同时针对乙醇,山梨醇,离子液体等作为诱导剂,诱导乙醛脱氢酶的高效表达。