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目的探讨RKIP基因表达上调对宫颈癌细胞生物学行为的影响。方法(1)应用脂质体转染法将含有正义(sense,ss) RKIP cDNA的真核表达载体转染入宫颈癌Caski细胞,并设置未转染的Caski细胞和空质粒转染细胞作为对照,G418浓度梯度筛选实验,使用最佳筛选浓度的G418筛选阳性克隆。(2)G418维持浓度扩大培养建立RKIP基因表达上调的稳定转染细胞(pcDNA3.1(+)-ssRKIP)。(3)应用Western-blot(蛋白印记法)检测RKIP基因转染前后人宫颈癌Caski细胞Raf激酶抑制蛋白的表达水平。(4)应用体外增殖实验(MTT法)、双层软琼脂集落形成实验、Transwell侵袭小室实验等观察RKIP基因对人宫颈癌Caski细胞体外增殖、侵袭及转移能力等生物学行为的影响。结果(1)通过脂质体转染法将含有目的基因RKIP及空白质粒分别转染入人宫颈癌Caski细胞,成功构建RKIP基因表达上调的人宫颈癌Caski细胞株(ssRKIP细胞),以及对应的空白质粒细胞株(pcDNA3.1(+)细胞)。(2)Western-blot法检测RKIP基因在转染前后细胞中的表达,ssRKIP细胞的RKIP蛋白表达水平上调,pcDNA3.1(+)细胞及未转染Caski细胞的RKIP蛋白表达则无明显差异。(3)体外增殖能力：ssRKIP细胞的体外增殖能力明显低于未转染Caski细胞,差异有统计学意义(P＜0.01)。(4)锚定非依赖性生长能力：ssRKIP细胞(克隆形成数112.78±5.60)与其对照组未转染Caski细胞(克隆形成数151.55±6.14)相比明显减少,差异有统计学意义(t=8.137,P＜0.01)；而对照组未转染Caski细胞的克隆形成数(151.55±6.14)与pcDNA3.1(+)转染细胞(159.11±3.64)比较,差异无统计学意义(t=3.8,P＞0.05)。(5)体外侵袭能力：ssRKIP细胞[穿膜细胞数为(54.33±4.12)]明显低于未转染细胞[穿膜细胞数为(80±3.20)],差异有统计学意义(t=9.25,P＜0.01)。结论(1)过表达RKIP基因对宫颈癌Caski细胞株的体外增殖、侵袭转移能力等生物学行为具有抑制作用。(2)RKIP基因可能是宫颈癌细胞的转移抑制基因,也可能是其抑癌基因。