随着我国设施蔬菜复种指数不断增加,根结线虫引起的病害逐年加重,成为设施蔬菜生产中毁灭性的重要病害。由于化学药剂防治对环境及人类健康存在严重危害,近年来环保安全的生物防治技术成为新的研究热点。课题组前期研究发现,添加蚯蚓可以明显减轻黄瓜根结线虫病害的发生,相关作用机理尚不明确。本研究以黄瓜连作土壤为研究对象,首先通过室内毒力鉴定,分析了不同浓度的蚯蚓及蚯蚓粪发酵液对根结线虫的抑制效果,并采用GC-MS技术分析了发酵液的化合物组分;进而通过盆栽试验筛选出可以促进黄瓜生长且抑制根结线虫病害的发酵液最佳浓度;最后通过田间试验明确蚯蚓原位堆肥与生物炭协同对设施黄瓜根结线虫病的防治效果并利用高通量测序技术分析蚯蚓原位堆肥对土壤微生物菌群的影响。主要研究结论如下:（1）通过室内毒力鉴定,当蚯蚓发酵液浓度为10%,根结线虫卵囊孵化的相对抑制率为73.58%,离体卵的孵化率为20.79%,二龄幼虫的死亡率达82.22%。蚯蚓及蚯蚓粪发酵液均可以显著抑制根结线虫的虫卵孵化和二龄幼虫存活,蚯蚓发酵液抑制效果优于蚯蚓粪发酵液。另外,对发酵液进行GC-MS分析表明,蚯蚓及蚯蚓粪发酵液中分别可检测出151和148种化合物,其组分及含量存在差异,其中苯乙醛、棕榈酸、苯类化合物、萘具有杀线虫作用。（2）通过盆栽试验,测定不同浓度蚯蚓及蚯蚓粪发酵液对黄瓜的生长和对根结线虫的防治效果,并测定土壤养分及酶活性。结果显示,与不浇灌（CK）相比,10%蚯蚓发酵液对根结线虫的防治效果达66.8%,能够减轻根结线虫病害的发生。另外,蚯蚓及蚯蚓粪发酵液对黄瓜生长均表现为低促高抑的趋势。10%蚯蚓发酵液与CK相比,速效氮、速效钾、有机质以及磷酸酶活性分别增加77.16%、41.29%、33.53%和63.84%（p＜0.05）,可以改善土壤肥力。通过室内毒力鉴定和盆栽试验发现,7.5%蚯蚓发酵液对根结线虫的防治效果最好。（3）不同土壤处理对黄瓜根结线虫数量影响结果表明,蚯蚓原位+生物炭处理在整个时期对黄瓜根结数量有显著的防治作用,其中在盛果期和拉秧期虫口减退率分别达66.51%、80.42%,植株发病率仅13.33%,防治效果达78.57%。另外,蚯蚓原位堆肥处理、生物炭处理对根结线虫的防治效果分别为71.42%、-35.71%。（4）采用高通量测序技术结果表明,对于黄瓜连作土壤根际细菌而言,与对照相比,VB处理的Ace指数、Simpson指数、Shannon指数均显著高于CK处理,分别高44.84%、45.63%和15.01%（p＜0.05）。对于黄瓜连作土壤根际真菌而言,与对照相比,各处理也增加了土壤真菌群落的丰富性和多样性。黄瓜根结数量与土壤微生物菌群相关性分析结果表明,黄瓜根结数量与变形菌门（Proteobacteria）、酸杆菌门（Acidobacteriota）和担子菌门（Basidiomycota）呈显著正相关,黄瓜根结数量与放线菌门（Actinobacteriota）、髌骨菌门（Patescibacteria）和罗兹菌门（Rozellomycota）呈显著负相关。