加味七方胃痛颗粒对胃癌细胞失巢凋亡的干预研究

来源 :广西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huninbo
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目的:本实验通过对加味七方胃痛颗粒干预人胃癌细胞SGC-7901裸鼠原位移植癌中Fas、FasL、FADD、Caspase-8基因的表达,以研究观察加味七方胃痛颗粒干预人胃癌裸鼠原位移植癌细胞凋亡水平的影响,探讨加味七方胃痛颗粒对胃癌细胞凋亡的作用机制。  方法:(1)以人胃癌细胞株SGC-7901反复接种传代于BalB/(nu/nu)裸鼠皮下,形成皮下移植瘤,以此为组织块材料,接种于裸鼠胃壁浆膜层,观察其生存状态及移植癌生长情况,构建人胃癌细胞株SGC-7901裸鼠原位移植动物模型。(2)待肿瘤长至直径约5mm时,将其随机分为4组,空白对照组、5-F组、中药组、5-F+中药组,通过注射及灌胃方式干预对应组裸鼠原位移植癌,每天观察其生存状态及移植癌生长情况。(3)所有分组于2W分别以颈椎脱臼处死全部裸鼠,完整剥离瘤体,称取瘤重,计算抑瘤率,肿瘤抑制率=(对照组瘤重-实验组瘤重)/对照组瘤重×100%。(4)处死裸鼠后,取瘤体标本,利用RT-PCR检测法测定四组裸鼠胃癌细胞中Fas、 FasL、FADD、 Caspase-8基因在mRNA水平的表达。利用western blot检测法检测裸鼠胃癌细胞中Fas、 FasL、FADD、 Caspase-8基因的蛋白表达量。利用ELISA检测法检测Fas、 FasL、 FADD、Caspase-8表达情况。  结果:(1)人胃癌细胞株SGC-7901裸鼠原位移植瘤模型构建成功,成功率100%(60/60)。(2)与对照组对比,七方胃痛颗粒对细胞凋亡有明显作用,可显著上调细胞因子Fas、 FasL、FADD、Caspase-8表达及增加Fas、FasL、FADD、Caspase-8表达量,差异具有统计学意义(P<0.05)。  结论:七方胃痛颗粒对治疗胃癌及抑制其进一步发展有明显的作用,可增强胃癌细胞因子Fas、FasL、FADD、Caspase-8的表达,从而诱导细胞凋亡。机制可能为通过上调Fas/FasL系统通路相关因子的表达水平,从而参与细胞的凋亡过程。
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