云南野生毛葡萄微繁殖体系及一种新的酿酒葡萄品质评价体系的建立

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为了有效保存、利用和评价云南野生葡萄资源,本研究开展了以下两方面的工作。首先,对云南野生葡萄资源毛葡萄(Vitisheyneana)的茎段分化再生、愈伤组织诱导及胚性悬浮细胞培养进行了比较系统地研究,建立了毛葡萄的微环境快速繁殖体系,为今后利用细胞工程保存细胞资源和选育酿酒葡萄打下了基础;其次,对叶片和果实中有机内含物、酶活性、抗氧化能力等理化指标的相关性进行了线性回归分析,成功建立了一套基于叶片性状评价酿酒葡萄果实品质的新体系。主要研究成果如下:  (1)以毛葡萄单芽茎段为外植体,在不同激素组合的培养基上进行分化再生及生根壮苗试验。正交试验结果表明:6-BA/IBA对茎段分化再生的效果要好6-BA/NAA,最佳激素配比为6-BA∶IBA=2.0mg/L∶0.1mg/L;而6-BA/IBA/NAA对壮苗有显著作用,IBA/NAA则对生根有显著作用,生根壮苗的最佳激素配比为6-BA∶IBA∶NAA=2.0mg/L(1.0mg/L)∶0.1mg/L∶1.0mg/L。  (2)以毛葡萄多腋芽茎段为愈伤诱导材料,在不同激素组合的培养基上进行愈伤诱导和继代试验。正交试验结果表明:当激素浓度配比为6-BA∶IBA=2.0mg/L∶0.75mg/L时,愈伤诱导率最高;当激素浓度配比为6-BA∶IBA=2.0mg/L∶0.5mg/L时,胚性愈伤质量最好。  (3)以毛葡萄胚性愈伤组织为细胞悬浮培养起始材料。当激素浓度配比为6-BA/IBA=0.5mg/L∶1.0mg/L时,细胞增殖快,对数期持续时间长;在连续继代培养中,不同糖浓度和基本培养基成分对细胞生长和活性没有明显影响;此外,本研究确定了继代周期,制备出了胚性保持力很好的悬浮细胞系。  (4)连续两年对云南丘北太阳魂酒庄同一时期葡萄的成熟叶片和果实进行采样,以其作为建模类群,并以德钦赤霞珠和嵩明野生毛葡萄作为检验类群。通过测定叶片和果实中的有机化合物、酶活性及抗氧化能力等11项理化指标,结合相关性和线性回归分析,构建并检验酿酒葡萄品质评价体系方程。结果表明:除总蛋白、DPPHRSA没有显著相关性外,总糖、还原糖、总黄酮、总滴定酸、总酚、SODA、PODA、MDA、SARSA等9组理化指标的叶片值与果实值存在较为显著的相关性;回归方程依次为lny=-1.611/x+1.639;lny=-3.797/x+2.913;lny=-6.876/x+2.623;lny=-11.237/x+4.034;lny=-0.217/x+1.002;lny=-3.078/x+2.049;y=205.965lnx-799.660;y=0.180lnx-0.759;y=95.373lnx-325.348(x为叶片测定值,y为果实预测值);经过检验,整体偏差在20%左右。因此,果实的品质就可以藉由叶片测定值进行有效地评价。
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