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研究目的:
1，制定三七叶总皂苷(LPNS)的质量标准，制定LPNS及其制剂七叶神安片的指纹图谱，为鉴别和含量测定提供方法依据，为抗抑郁组合成分提供分离和检验方法。
2，筛选抗抑郁效果比LPNS更好的组合成分，进一步确定抗抑郁有效成分。
研究方法：
1，薄层色谱(TLC)鉴别方法及指纹图谱。
筛选样品浓度，薄层板型号和展开剂体系。方法学验证精密度和耐用性，考察展开剂配置温度和时间，展开距离，展开温度和湿度及不同厂家预制板对展开的影响，制定可靠稳定的鉴别方法，建立LPNS指纹图谱。
2，高效液相色谱(HPLC)鉴别，含量测定方法及指纹图谱。
以保留时间(TR)、分离度(R)、理论塔板数，拖尾因子及峰数为参考指标，分别对梯度洗脱程序，温度，流速，酸度考察。方法学验证：准确度，精密度，线性，范围，耐用性。制定HPLC鉴别和含量测定方法，制定LPNS及其制剂七叶神安的指纹图谱。
3，紫外-可见分光光度法(UV-vis)鉴别和含量测定的方法学考察及指纹图谱。
高氯酸-香草醛比色法，扫描λ200nm～600nmUV-vis吸收图谱，方法学考察：吸收峰的来源，测量波长的选择，吸收峰的内在联系，对照品的选择对测定结果的影响，Rb3为标准品的准确度和精密度。制定LPNS样品高氯酸-香草醛比色法的LPNS UV-vis指纹图谱。
4，LPNS组合物的分离。
创建低温高效干柱层析法，10～15℃，300-400目硅胶，展开剂：CH2Cl2∶MeOH∶H2O(65∶35∶10)，按三种不同长度截取，MeOH提取，真空旋蒸浓缩，Me2CO沉淀，减压干燥得到组合物。
5，抗抑郁活性组合物的筛选。
20±2g雄性KM小鼠，100mg/kg,50mg/kg两个剂量的LPNS、组合物与阳性药物，阴性对照共18组，比较开场(OFT)，强迫游泳(FST)，悬尾(TST)，利舍平拮抗抑郁模型的抗抑郁效果，筛选最佳组合物。
结果:
1,TLC∶10mg/ml LPNS，硅胶G板，三个展开剂体系效果较好：①，CHCl3∶MeOH∶H2O65∶35∶10(下层)；②，MC∶MeOH∶H2O65∶35∶10(下层)；③，CHCl3∶MeOH∶EtOAc∶H2O15∶22∶40∶10(下层)，展开剂0～10℃放置12h，展开温度10℃～27℃，湿度39％～61％，展开8cm分离效果好且方法稳定。
2，HPLC：建立了完善的LPNS指纹图谱洗脱程序，29个主要共有峰中有26个峰R＞1.5，日内差、日间差均小于0.3％，Rb1,Rb2,Rb3,Rg3,F1，F2线性回归r＞0.99995，回收率95％～102％。建立了八批LPNS及十批七叶神安的指纹图谱。
3，UV-vis：三个吸收峰λ277±2nm和389±2nm、510±3nm分别为糖苷和皂苷元特征吸收波长。阴性对照对λmax277±2nm影响最大，λ510±3nm影响最小。一定浓度的LPNS277/510nm吸光度比值稳定。Rb1,Rb2,Rb3,Re,R1，F1,Rg3吸光度修正因子不同，Rb3与LPNS质量-吸光度线性较接近且稳定，但Rb3准确度、精密度不合格，可选择LPNS作对照品。
4，组合物分离：低温高效干柱层析分离效果好，一次性层析共获得18个不同组合物。
5，药效学筛选：筛选到G，E，D，C四个组合物。
结论:
成功建立了LPNS的TLC，HPLC，UV-vis鉴别和含量测定方法，为分离及分析鉴定提供了方法，为质量标准制定提供了依据，为LPNS质量控制提供了更全面的指纹图谱信息。通过药理模型筛选出比总皂苷更有效的组合成分。