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虎掌菌学名枣翘鳞肉齿菌(Sarcodon aspratus),隶属于担子菌纲多孔菌科多孔菌属,主要分布在日本,朝鲜,中国的南部等地,具有良好的食用与药用价值,含有多种活性成分。本文旨在优化虎掌菌液体发酵条件并从菌丝体中提取多糖等物质并研究其潜在的功能活性。(1)响应面法优化虎掌菌液体培养条件：本实验首先筛选了最佳的碳源与氮源分别为葡萄糖与酵母粉。利用Plackett-Burman实验设计确定了影响虎掌菌菌丝体得率的显著因素酵母粉、KH2P04、培养时间。通过爬坡实验确定浓度范围,继而利用响应面Box-Benhnken Design设计确定主要影响因子的最佳浓度为：酵母粉15.15g/L、KH2P041.27g/L、培养时间为4.17d；其他培养条件为：葡萄糖20g/L、CaCl21.2g/L.温度28℃、转速180r/min装液量200mL、接种量3%。菌丝体得率达到最大值达到12.71g/L较优化前的8.69g/L,提高了46%,为虎掌菌的进一步研究提供材料来源。(2)分离纯化虎掌菌多糖并初步探讨其抗肿瘤活性：利用水提醇沉的方法得到虎掌菌粗多糖SA。用DEAE-Sepharose F·F离子交换柱与AKTA Superdex200柱层析进一步对其进行纯化得到两种均一性较好的多糖命名为PSAN、 PSAA。通过HPLC图谱分析,其分子量分别为5.6×104Da与3.83×105Da；单糖组成为：PSAN由木糖、鼠李糖和甘露糖组成,摩尔比为：0.1：1：2.1,PSAA由鼠李糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,摩尔比为0.11：4.3：8.4：1.1：2.3。根据红外图谱分析PSAN与PSAA都为β型吡喃杂多糖。选用人肝癌HepG2细胞、人宫颈癌Hela细胞和肺癌As49三种肿瘤细胞体外增殖实验作虎掌菌多糖SA的抗肿瘤活性筛选,SA抑制Hela细胞增殖的作用明显优于其他两种肿瘤细胞(p<0.05)。进一步研究均一组份PSAN与PSAA对Hela增殖的影响,发现高浓度的PSAA对Hela的抑制率达到70%,且对正常人肝细胞没有毒副作用。(3)虎掌菌醇提物ESA对AD(阿尔茨海默)模型tau蛋白磷酸化的影响：不同浓度的虎掌菌醇提物ESA可以显著降低OA(冈田酸)致AD样N2a细胞tau蛋白的过度磷酸化水平(p<0.05)。同时p-GSK-3β与tau-O-GlcNAc的表达水平有上升趋势,推测ESA通过改变GSK-3β磷酸化实现抑制tau过度磷酸化的作用,结合细胞生长状态的观察结果,显示ESA在细胞水平对OA所致AD样N2a细胞有一定的保护作用。在动物水平的研究发现,提前给小鼠灌胃20mg/kg.d的ESA30天后,Aβ海马注射建立拟AD小鼠模型,其海马p-tau的表达量低于对照组(p<0.05), p-GSK-3β与O-GlcNAc的水平上升,小鼠的行为较对照组有明显的改善,推测ESA可以一定程度的预防和抵抗Aβ引起的毒性。对Aβ诱导的AD小鼠灌胃ESA30天后,其p-tau、p-GSK-3β与O-GlcNAc的表达与模型组相比没有显著差异,结合行为观察推测ESA对Aβ致AD小鼠没有作用。