稻瘟病菌MoCrbp1和MoCrg1基因的功能分析

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水稻是我国重要粮食作物,稻瘟病(rice blast)是水稻的重要病害之一,其病原菌为稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae syn.Pyricularia oryzae),是重要的农业病原微生物,该病菌引起的稻瘟病会给水稻生产造成严重的产量损失。我们实验室前期的研究发现,碳代谢阻遏子MoCreA参与调控稻瘟病菌的产孢和致病性,转录组测序发现,MoCre A的缺失突变体中,两个功能未知的基因MoCrbp1和MoCrg1的表达量大幅度降低,我们推测它们可能有着重要的功能。为了研究该两基因的功能,首先,应用定量PCR的方法验证了MoCrbp1和MoCrg1在MoCre A突变体中的下调表达特性。蛋白结构域分析发现,MoCrbp1包含BTB/POZ结构域;而MoCrg1包含真菌中特有的Zn2Cys6基序,与类GAL4转录因子同源。通过原生质体转化的同源重组方法对两个基因进行了敲除,发现相较于野生型稻瘟病菌Guy11,突变体ΔMoCrbp1与ΔMoCrg1的致病力有所减弱,产生分生孢子数减少,在CM+H2O23m M培养基上出现生长被抑制现象;相比于野生型Guy11,ΔMoCrbp1突变体分生孢子形成附着胞的时间延长、形成率下降,同时附着胞内膨压下降。研究结果为进一步探究MoCrbp1和MoCrg1在稻瘟病菌中的生物学功能和致病机制奠定了基础。
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